產(chǎn)品名稱：犬腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISA試劑盒

 操作步驟
1.標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL,；,。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,，然后再加待測樣品 10μl（樣品終稀釋度為 5 倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。
3.加酶：每孔加入酶標試劑 100μl，空白孔除外,。
4.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘,。
5.配液：將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。
6.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去,，如此重復 5 次，拍干,。
7.顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl,，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
8.終止：每孔加終止液 50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
9.測定：以空白孔調零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

犬腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISA試劑盒

 注意事項：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。樣本在使用前也要在室溫平衡 60 分鐘,。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間盡量控制在 5 分鐘內,，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線,，盡量做復孔,。如標本中待測物質含量過高（樣本 OD 值大于標準品孔第one孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,，以英文說明書為準,。