木質(zhì)素過氧化物酶（Lip）檢測試劑盒 （紫外分光光度法）

注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定,。

產(chǎn)品貨號：BA1214

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣

產(chǎn)品簡介：

木質(zhì)素過氧化物酶（EC1.11.1.14）是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶，屬于木質(zhì)素降解酶系,，在木質(zhì)素生物降解,、造紙工業(yè),、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力,。木質(zhì)素過氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛,，在310nm處有特征吸收峰。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體80mL×1瓶,，4℃保存,。

試劑二：液體10mL×1瓶，4℃避光保存,。

試劑三：液體5mL×1瓶,，4℃保存。

需自備的儀器和用品：

天平,、研缽,、低溫離心機、紫外分光光度計,、1mL石英比色皿,。

操作步驟：

一、酶液提取

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g,，加入1mL試劑一）加入試劑一,，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min,，取上清置于冰上待測,。

2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w,，超聲3秒,，間隔7秒，總時間3min）,；然后4℃,，10000g離心10min，取上清置于冰上待測,。

3. 培養(yǎng)液或其它液體：直接檢測,。

二、測定操作

三、酶活計算公式

1.  按照蛋白濃度計算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位,。

LiP活性（nmol/min/mgprot）=△A÷（ε×d）×V反總÷（V樣×Cpr）÷T=215×△A÷Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計算

酶活性定義：每克樣品每分鐘氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位,。

LiP活性（nmol/min/g）=△A÷（ε×d）×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T=215×△A÷W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計算

酶活性定義：每10⁴個細(xì)胞每分鐘氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位,。

LiP活性（nmol/min/10⁴cell）=△A÷（ε×d）×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）÷T=215×△A÷細(xì)胞數(shù)量

4. 按照液體體積計算

酶活性定義：每升培養(yǎng)液每分鐘氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位。

LiP活性（nmol/min/L）=△A÷（ε×d）×V反總÷V樣÷T=2.15×10⁵×△A

ε：藜蘆醛摩爾消光系數(shù)：9300L/mol/cm,；d：比色皿光徑,，1cm；V反總：反應(yīng)總體積,，1mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積,，0.1mL,；V樣總：加入提取液體積，1mL,；Cpr：樣本蛋白濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,；T：反應(yīng)時間，5min,。