尿素氮（BUN）含量檢測試劑盒（微量法）

注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

產(chǎn)品貨號：BA1243

產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣

產(chǎn)品簡介：

尿素（BUN）是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物,，BUN構(gòu)成了血液中絕大部分的非蛋白質(zhì)氮,，血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。用靛酚藍(lán)比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N,，生成的藍(lán)色靛酚和尿素氮的濃度成正比,。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：粉劑×2瓶，4℃避光保存,，臨用前加2mL蒸餾水充分溶解,。

試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存,。

試劑三A液：液體20mL×1支,，4℃保存；

試劑三B液：液體20mL×1瓶,，4℃保存,；

將AB溶液保存在冰箱中。使用前將2溶液各20毫升混合,，用蒸餾水稀釋至100毫升,。

試劑四：液體10mL×1瓶，4℃避光保存,。

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1瓶,，4℃保存。10mg尿素,。臨用前加入4.66mL蒸餾水配制成1mg/mL尿素氮標(biāo)準(zhǔn)液,。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、天平,、研缽/勻漿器,、低溫離心機、微量玻璃比色皿/96孔板,、恒溫水浴鍋,。

操作步驟：

一、樣品處理

1,、組織：按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5-10的比例（建議稱取約0.1g,，加入1mL蒸餾水），冰上勻漿后于4℃,，13000g離心15min,，取上清待測。

2、細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個）：蒸餾水體積（mL）為500-1000：1的比例（建議500萬個細(xì)胞加入1mL蒸餾水）,，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w,，超聲3s，間隔7s,，總時間3min）,；然后4℃，13000g離心15min,，取上清置于冰上待測,。

3、血清（漿）或其它液體：直接檢測,。

二,、測定操作：

1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,，波長調(diào)至630nm,，分光光度計蒸餾水調(diào)零。

2,、將1mg/mL尿素氮標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至50μg/mL備用,。

3、加樣表：

三、計算公式：

1,、按樣本質(zhì)量計算：

尿素氮含量（μg/g）= ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷W

=25×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W,。

2.按蛋白濃度計算：

尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷（Cpr×V提取）

=25×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr,。

3,、按細(xì)胞數(shù)計算：

尿素氮含量（μg/10⁴ cell）= ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷細(xì)胞數(shù)量

=25×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷細(xì)胞數(shù)量。

4,、按液體體積計算：

尿素氮含量（μg/mL）=ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品

=25×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)。

C標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度，25μg/mL,；V提?。禾崛∫后w積，1mL,；W：樣品質(zhì)量,，g；Cpr：樣品蛋白濃度,，mg/mL,；細(xì)胞數(shù)量：以萬計。

注意事項：

1,、配制好的試劑一在2-8℃條件下可保存一周,。

2、ΔA測定大于1或者A測定管大于1時,，建議將樣品用蒸餾水稀釋后在進行測定,。