山梨醇含量檢測(cè)試劑盒（可見(jiàn)分光光度法）

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定,。

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1274

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

山梨醇廣泛存在于動(dòng)物、植物,、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,，不僅是糖運(yùn)輸形式之一，而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān),。因此,，在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測(cè)山梨醇含量變化,。

山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物,，在655nm波長(zhǎng)有特征吸收峰。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體15mL×1瓶,，4℃保存,；

試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存,；

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑10mg×1支,，4℃保存。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì),、水浴鍋,、移液器、1mL玻璃比色皿,、研缽,、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、山梨醇的提?。?/span>

按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.2g組織,，加入2mL蒸餾水），研磨成勻漿,， 95℃水浴10分鐘（蓋緊,，以防止水分散失），冷卻后,，8000g,，25℃離心10min，取上清液待測(cè),。

標(biāo)準(zhǔn)樣品準(zhǔn)備：將標(biāo)準(zhǔn)液用1ml蒸餾水溶解,，溶液濃度為10mg/ml，稀釋至2,、1,、0.5、0.25,、0.125,、0mg/ml。

二,、測(cè)定步驟

1,、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至655nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）：

混勻后室溫靜置15min,，10000g,，常溫離心10min，取上清液測(cè)655nm 下吸光值A,。

三,、山梨醇含量計(jì)算：

1、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和吸光度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),； y為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL）,，x為吸光值。計(jì)算樣本中山梨醇的含量y值（mg/mL）,。

2,、按照樣本質(zhì)量計(jì)算

山梨醇含量（mg /g鮮重）＝y×V1÷(W×V1÷V2)= 2y÷W

3、按照樣本蛋白濃度計(jì)算

山梨醇含量（mg /mg prot）＝y×V1÷(V1×Cpr)=y÷Cpr

V1：加入樣本體積,，1mL,；V2：加入提取液體積,，2mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量，g,。