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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
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貨號 | BA1411-50 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
血清總鐵結合能力(TIBC)檢測試劑盒(可見分光光度法)
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定,。
產品貨號:BA1411
產品規(guī)格:50管/48樣
產品內容:
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
試劑二:液體5mL×1瓶,,4℃避光保存。
試劑三A:液體2.5mL×1瓶,,4℃避光保存,。
試劑三B:液體2.5mL×1瓶,4℃避光保存,。(臨用前根據(jù)用量將A液和B液按1:1混合)
試劑四:液體15mL×1瓶,,4℃保存。
標準品:粉劑×1 支,,4℃保存,。臨用前加入1.8mL蒸餾水溶解,得到20μmol/mL FeSO4•7H2O溶液,。然后蒸餾水稀釋至0.5μmol/mL備用,。
產品說明:
血清總鐵結合能力指血清轉鐵蛋白可結合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血,、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關,。
Fe2+與菲洛嗪反應形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰,。堿性條件下,,血清轉鐵蛋白可以Fe3+結合,剩余未結合的Fe3+可以被還原成Fe2+,,此時吸光度A1與未結合Fe3+數(shù)量正相關,;酸化后,轉鐵蛋白結合的Fe3+釋放,,并且進一步被還原成Fe2+,,此時吸光度A2與總Fe3+數(shù)量正相關。A2減A1與TIBC呈正比,。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計,、水浴鍋、臺式離心機,、1mL 玻璃比色皿,、蒸餾水。
操作步驟:
1,、分光光度計預熱 30min 以上,,調節(jié)波長至 562nm,蒸餾水調零,。
2,、樣本測定(在 EP 管中加入下列試劑)
試劑名稱(μL) | 測定管 | 空白管 | 標準管 |
血清 | 100 | - | - |
0.5μmol/mL 標準液 | - | - | 100 |
蒸餾水 | - | 200 | 100 |
試劑二 | 100 | - | - |
混勻,,37℃,10min | |||
試劑一 | 700 | 700 | 700 |
試劑三 | 100 | 100 | 100 |
混勻,,37℃,,5min,蒸餾水調零,,測定562nm處吸光值A1,,測完后立即加入試劑四 | |||
試劑四 | 300 | 300 | 300 |
混勻,37℃,,5min,,蒸餾水調零,測定562nm處吸光值A2,。 |
三,、血清總鐵結合力計算:
總鐵結合能力定義:37℃條件下,每升血清結合Fe3+的μmol數(shù),。
總鐵結合能力TIBC(μmol/L)=[C標準××V樣-C標準××V樣]
=[500×(A2測-A2空)/(A2標-A2空)-500×(A1測-A1空)/(A1標-A1空)]
C標準:標準液濃度,,0.5μmol/mL;V樣:加入血清樣本體積,,0.1mL=100×10-6L,。
注意事項:
1. OD值大于0.8,樣品適當稀釋再測定,,注意計算公式里乘以稀釋倍數(shù),。
2. 試劑二、試劑三有一定的毒性,,操作時請做好防護措施,。
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