組織無(wú)機(jī)磷含量檢測(cè)試劑盒（可見(jiàn)分光光度法）

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定,。

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1481

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存,。

試劑二：液體10mL×1瓶,，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶,，4℃避光保存,。臨用前配制，加入20 mL蒸餾水,，充分溶解后加入試劑二(全部),，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支,，1mmol/L無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液,，4℃保存。

產(chǎn)品說(shuō)明：

無(wú)機(jī)磷主要指磷酸根,，參與生物體內(nèi)多種代謝,，包括能量代謝、核酸代謝,、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等，此外促進(jìn)碳水化合物的合成,、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運(yùn),。

鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過(guò)測(cè)定660nm光吸收,，即可計(jì)算無(wú)機(jī)磷含量,。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、離心機(jī),、水浴鍋,、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水,。

操作步驟：

一,、無(wú)機(jī)磷提取：

稱(chēng)取約0.1g組織,，加試劑一1.0 mL冰上充分勻漿,，4℃，10000rpm,，離心10min,，取上清液，置冰上待測(cè),。

二,、測(cè)定：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660nm，蒸餾水調(diào)零,。

2. 打開(kāi)水浴鍋,，調(diào)節(jié)溫度到40℃。

2. 測(cè)定：

分別混勻后置于40℃水浴保溫10min,，室溫冷卻10min后于660nm測(cè)定吸光度,，分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管,、A測(cè)定管,。

注意：需在40min內(nèi)完成比色，空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次,。

三,、組織無(wú)機(jī)磷含量計(jì)算：

無(wú)機(jī)磷含量(mmol/g 樣本鮮重)= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V總÷W

=0.001×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液：1mmol/L；V總：上清液總體積,，1mL=0.001 L,；W：樣品質(zhì)量，g,。

注意事項(xiàng)：

1,、試劑三需臨用前配制，限當(dāng)天使用,。

2,、測(cè)定前先用1~2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如吸光值大于0.8,，需用蒸餾水做相應(yīng)稀釋,。