雙縮脲總蛋白試劑

產(chǎn)品貨號(hào)：T15260

產(chǎn)品規(guī)格：100ml/500ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

雙縮脲是一種用于分析蛋白質(zhì)的方法，雙縮脲反應(yīng)的原理是在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下,，銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復(fù)合物,，呈紫色。所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成比例,?？赏ㄟ^比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長(zhǎng)為540nm,。雙縮脲法測(cè)定蛋白濃度兼容性亦很好,，不受大部分樣本中其他成分的影響，但易受銅離子螯合劑影響,，另外,，對(duì)于血清總蛋白的雙縮脲分析，膽紅素,、脂類,、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用,。

尚寶生物 雙縮脲總蛋白試劑由硫酸銅,、酒石酸鉀鈉、氫氧化鈉等組成，在10～160mg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系,，是對(duì)蛋白質(zhì)的精確定量分析試劑,。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

• 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀
• 96孔板或離心管

雙縮脲總蛋白試劑操作步驟(僅供參考)：

• 取1ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液或稀釋液加入到蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)中，充分溶 解后配制成160mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,，配制后可立即使用,，溶解后的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃保存。

特別提示：待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中,。例如待測(cè)蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中,。一般也可以用0.9%NaCl或PBS作為溶解BSA稀釋液,。

• 將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔，加稀釋液補(bǔ)足至20μl,。
• 加適當(dāng)體積待測(cè)蛋白樣本到96孔板的樣品孔中,。如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測(cè)蛋白樣本的溶液不同，應(yīng)在待測(cè)蛋白樣本孔中加入20μl稀釋液,；如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測(cè)蛋白樣本的溶液相同,，無需在待測(cè)蛋白樣本孔中加入 20μl 稀釋液。
• 各孔加入200μl 雙縮脲總蛋白試劑, 室溫放置10～15min,。
• 測(cè)定540nm波長(zhǎng)處的吸光值,，如無540nm，520～562nm之間的波長(zhǎng)也可,。
• 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品的蛋白濃度,。

注意事項(xiàng)：

• 待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中,，否者待測(cè)蛋白與蛋白標(biāo)準(zhǔn)中所含非蛋白成分不一致,，有可能導(dǎo)致測(cè)定不準(zhǔn)確。
• 待測(cè)蛋白和蛋白標(biāo)準(zhǔn)加入雙縮脲試劑后,，如果發(fā)現(xiàn)檢測(cè)效果不佳,，可以室溫放置1h或60℃放置15min，顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深,。顯色反應(yīng)也會(huì)隨溫度升高而加快,。如果濃度較低，可以適當(dāng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間或在較高溫度下孵育,。

• 測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)發(fā)現(xiàn)隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯發(fā)化,，可能的原因是樣品中含有銅離子螯合劑。
• 建議每次測(cè)定時(shí)都做標(biāo)準(zhǔn)曲線,。因?yàn)轭伾珪?huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深，并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān)，所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度,，否則如需精確測(cè)定宜每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
• 如果沒有酶標(biāo)儀，也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定,，但應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的最小檢測(cè)體積,。應(yīng)按比例適當(dāng)加大雙縮脲試劑的用量使總體積不小于最小檢測(cè)體積，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的用量亦相應(yīng)按比例放大,。使用分光光度計(jì)測(cè)定蛋白濃度時(shí),，每個(gè)試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著減少。
• 檢測(cè)中出現(xiàn)所有孔都呈暗紫色,，可能原因是樣品含有還原劑,，應(yīng)適當(dāng)透析或稀釋樣品。
• 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

有效期：12個(gè)月有效。