RIPA裂解液

產(chǎn)品貨號(hào)：T16003

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

保存條件：運(yùn)輸4℃,，長(zhǎng)期保存-20℃

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

    RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液,。RIPA裂解液裂解得到的蛋白 樣品可以用于常規(guī)的Western,、IP等,。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。本產(chǎn)品RIPA裂解液的主要成分為50mM Tris(pH7.4),，150mM NaCl,，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate,，0.1% SDS等,。

操作步驟：

• 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：

• 對(duì)于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液,，用PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有  干擾，可以不洗),。按照每10⁷細(xì)胞加入200微升裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,，細(xì)胞就會(huì)被裂解。
• 對(duì)于懸浮細(xì)胞,，離心收集細(xì)胞,，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照每10⁷細(xì)胞加入200微升裂解液  的比例加入裂解液,。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,，可適量添加裂解液,。
• 充分裂解后，10000-14000rpm離心5-10分鐘,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western,、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作,。

• 對(duì)于組織樣品：

• 把組織剪切成細(xì)小的碎片。
• 按照每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添 加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
• 用玻璃勻漿器冰上勻漿,，直至充分裂解,。
• 充分裂解后，10000-14000rpm離心5-10分鐘,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western,、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作,。
• 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,，通過強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分,。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。

注意事項(xiàng) ：

• 裂解得到的蛋白樣品,，由于含有較高濃度的去垢劑干擾，不能用Bradford法測(cè)定蛋白濃度,，可以選用本公司生產(chǎn)的BCA蛋白定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度,。
• 用戶使用前可根據(jù)需要加入蛋白酶抑制劑如PMSF或者根據(jù)需要再加入leupeptin，aprotinin等其它抑制劑,。
• 裂解液中SDS 4℃保存易沉淀析出,，使用前應(yīng)該37℃-60℃水浴重新溶解*后回復(fù)到室溫使用。
• 裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行,。

誠(chéng)招全國(guó)地區(qū)代理經(jīng)銷商?。?！

尚寶主營(yíng)產(chǎn)品：

試劑盒

· 細(xì)胞活力/毒性檢測(cè)試劑盒

· 蛋白提取相關(guān)試劑盒

· 蛋白定量/濃度測(cè)定試劑盒

· 核酸純化/提取相關(guān)試劑盒

· 核酸檢測(cè)試劑盒

· 染色試劑盒

· 生化試劑盒檢測(cè)試劑盒

染色類

染色液     固定液    脫鈣液     染色輔助試劑     指示劑     

熒光染料

通用Buffer      常規(guī)溶液  

核酸類       蛋白與免疫   

生化試劑    病理常用染色試劑   

細(xì)胞類      細(xì)胞培養(yǎng)基 

標(biāo)準(zhǔn)品      ELISA 試劑盒   

DNA Marker   耗材

上海尚寶生物科技有限公司是一家集研發(fā),、生產(chǎn)、銷售,、服務(wù)于一體的高科技生物企業(yè),。公司總部位于上海、在全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu),。公司秉承“以客戶為中心,、以產(chǎn)品為保障、以誠(chéng)信為基礎(chǔ),、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,，擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及*倉(cāng)儲(chǔ)和物流系統(tǒng),，為各大院校、科研單位,、醫(yī)院,、生產(chǎn)廠商等單位提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)，大程度地滿足用戶的需要,。 
公司擁有一批專業(yè)的博士,、碩士研發(fā)人員，專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新,。產(chǎn)品覆蓋面廣,，品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué),、免疫學(xué),、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒,。同時(shí)，尚寶生物公司提供各種常規(guī)生化試劑,，可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑,。在質(zhì)量方面，尚寶生物謹(jǐn)記公司信念：質(zhì)量高于一切,。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程,，科學(xué)的質(zhì)量檢測(cè)方法和成熟的質(zhì)量檢測(cè)程序，我們恪守對(duì)每一位用戶的承諾：用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌,。同時(shí),，公司組建了一支專業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍，能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁I(yè)的技術(shù)服務(wù),。每一位購(gòu)買尚寶生物產(chǎn)品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和售后服務(wù),。

尚寶生物公司堅(jiān)持與國(guó)際接軌，注重和*企業(yè)的合作與交流,，目前已經(jīng)和Sigma,、Thermo、Axygen,、Merck,、Roche、Amresco,、Millipore,、Whatman、Corning,、Fluka,、Serva等較有名企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,，并提供產(chǎn)品代理、市場(chǎng)咨詢等多項(xiàng)服務(wù),。公司將一如既往與世界更多品牌合作,，為廣大生物科研工作者提供優(yōu)質(zhì)、專業(yè)的服務(wù),。公司理念：“為科研服務(wù),，為生命盡責(zé)”。一個(gè)人能夠走多遠(yuǎn),，取決于與誰(shuí)同行,。尚寶生物公司期待與各同行精誠(chéng)合作，為廣大科研工作者提供更加優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),。