5×蛋白上樣緩沖液（含DTT）

產(chǎn)品貨號：T15257

產(chǎn)品規(guī)格：10ml

產(chǎn)品簡介：

  5×蛋白上樣緩沖液（含DTT）(Buffer)適用于SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質(zhì)上樣用,。其主要成份為SDS，DTT,，溴 酚藍(lán),，緩沖鹽溶液等。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,，這時蛋白質(zhì)本身的電荷完 全被SDS掩蓋,，消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異；SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,，破壞蛋白質(zhì)分子的 二級和三級結(jié)構(gòu),。DTT可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),，消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異,。 終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白（亞單位），電泳速度只是與其分子量大小有關(guān),。溴酚藍(lán)用作電泳時的指示劑,，可大概指示電泳結(jié)束的時間。

操作步驟(僅供參考)：

1. 請按每40μL蛋白樣品加入10μL上樣緩沖液的比例(5倍稀釋)來使用,。如果蛋白樣品濃度過高,，可用雙蒸水稀釋。

2. 混勻后,，100℃水浴加熱5-10分鐘,，使蛋白變性,。

3. 冷卻至室溫后，10000-14000rpm離心2-5分鐘,，取上清直接上樣電泳即可,。

注意事項：

1. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在30kd左右，膠濃度為12%時,，約在20kd左右,，膠 濃度為15%時，大概在10kd,。請根據(jù)自己目的條帶來判斷電泳時間,。

2. 本試劑因含DTT，有一定的毒性,，為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3. 蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍(lán)指示劑,，PH 值受保存溫度影響,，在低溫凍存狀態(tài)下，溶液可能會呈現(xiàn)深棕色,， 不影響產(chǎn)品使用,。

保存條件：

?  -20℃保存，建議分裝凍存,，避免反復(fù)凍融,，自發(fā)貨之日起至少12個月有效。