酵母質(zhì)粒提取試劑盒   核酸提取純化

產(chǎn)品貨號：26220

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

       酵母質(zhì)粒提取試劑盒   核酸提取純化采用酶法破碎酵母細(xì)胞壁和堿裂解法裂解酵母細(xì)胞來提取酵母質(zhì)粒 DNA,。所采用的酵母破壁酶能有 效地破壞酵母細(xì)胞壁,，提高酵母質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量。吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料能高效,、專一地吸附 DNA,，可 大限度去除雜質(zhì)蛋白質(zhì)及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。使用酵母質(zhì)粒提取試劑盒提取的酵母質(zhì)粒 DNA 可適用于各種常規(guī)的分子 生物學(xué)實驗,，包括酶切,、PCR,、測序、連接和轉(zhuǎn)化等試驗,。本試劑盒無需使用酚等有毒試劑,，操作安全。

產(chǎn)品組成：

注意：使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,，加入體積請參照瓶體上的標(biāo)簽,。YP1 在使用前先加入 RNaseA （將 試劑盒中提供的 RNaseA 全部加入），混勻,，置于 2-8 ℃保存,。如非指明，所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在 室溫下離心,。

操作步驟：

1. 取 1-5ml 酵母培養(yǎng)物（不超過 5×10 7 cells）,，12000rpm 離心 1min，盡量吸除上清（菌液較多時可以通過多 次離心將菌體沉淀收集到一個離心管中）,。

2. 酵母細(xì)胞壁的破除： A,、酶法：向酵母菌體中加入 470ul 山梨醇 Buffer，充分懸浮菌體,，加入 25ul 酵母破壁酶和 5ul 巰基還原劑,， 充分混勻，30℃處理 1-2h,，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,。12000rpm 離心 1min，棄上清,，收集沉淀,。向沉淀 中加入 250ulYP1（請先檢查是否已加入 RNaseA），充分懸浮沉淀,。注意：如果菌塊未*混勻,，會影響裂 解導(dǎo)致質(zhì)粒提取量和純度偏低。 B,、玻璃珠法：向酵母菌體中加入 250ul YP1（請先檢查是否已加入 RNaseA）,，充分懸浮沉淀。加入 150-200ul 酸洗玻璃珠（自備）,，漩渦振蕩 10min,。簡短離心使玻璃珠沉降到離心管底，吸取上清（如上清有所損失,， 請用 YP1 補(bǔ)足至 250ul）于另一干凈離心管中,。

3. 向離心管中加入 250ul YP2，溫和地上下翻轉(zhuǎn) 6-8 次使菌體充分裂解。注意：混勻一定要溫和,，以免污染細(xì) 菌基因組 DNA,，此時菌液應(yīng)變得清亮粘稠，作用時間不要超過 5 min,，以免質(zhì)粒受到破壞。