高純度質(zhì)粒小提試劑盒  核酸提取純化

產(chǎn)品貨號：26210

產(chǎn)品規(guī)格：50 次/100 次/200 次

產(chǎn)品簡介：

  高純度質(zhì)粒小提試劑盒  核酸提取純化適合提取 1-5 ml 菌液,，在堿裂解法裂解細胞的基礎(chǔ)上,，采用*的硅基質(zhì)膜吸附技術(shù)和試劑配方， 通過離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下高效專一的結(jié)合溶液中的質(zhì)粒 DNA,，每個吸附柱可吸附 30 μg 的質(zhì)粒 DNA,， 并更大限度的去除蛋白質(zhì),、基因組,、RNA 和其他雜質(zhì)。得到的質(zhì)粒 DNA 可直接用于細胞轉(zhuǎn)染,、PCR,、酶切、測 序,、連接等生物學實驗,。

包裝清單：

自備試劑：

  使用前 Buffer PE 50 次加入 36ml 無水乙醇/100 次加入 72ml 無水乙醇/200 次加入 144ml 無水乙醇

操作步驟：

1. 取-5 ml 過夜培養(yǎng)的菌液加入離心管（自備）中，12000 rpm 離心 30 秒收集菌體沉淀,，盡量吸棄上清,。

2. 向留有菌體沉淀的離心管中加入 250μl Buffer P1，使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮菌體沉淀,。 注意：如果菌塊未*混勻,，將會影響裂解效果，導致提取量和純度偏低,。

3. 向離心管中加入 250μl Buffer P2,，溫和地上下顛倒混勻 4-6 次，充分混勻使菌體裂解,，此時溶液應變得清亮 粘稠,。 注意：溫和混勻，不要劇烈震蕩,，以免打斷基因組 DNA,，造成提取的質(zhì)粒中混有基因組 DNA的片段。

4. 此步驟所用時間應不超過 5 分鐘,，避免質(zhì)粒受到破壞,。

5. 向離心管中加入 350μl Buffer N3，立即溫和地上下顛倒混勻 8-10 次,，充分混勻,，此時應出現(xiàn)白色絮狀沉淀。 12000 rpm 離心 5 分鐘,。 注意：Buffer N3 加入后應立即混勻,，避免產(chǎn)生局部沉淀。

6. 將步驟 4 中所得的上清液轉(zhuǎn)移到已裝入收集管的吸附柱（Spin Columns）中,，12000 rpm 離心 30 秒鐘,，倒掉 收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中,。

7. 向吸附柱中加入 500μl Buffer PB,，12000 rpm 離心 30 秒。

8. 向吸附柱中加入 750μl Buffer PE（請先檢查是否已加入無水乙醇）,，12000 rpm 離心 1 分鐘,，倒掉收集管中 的廢液。

9. 將吸附柱置于一個新的離心管（自備）中,，向吸附膜的中間部位加入 50μl BufferEB,，室溫放置 1 分鐘，12000 rpm 離心 1 分鐘,，將質(zhì)粒溶液收集到離心管中,。-20℃保存質(zhì)粒。