細(xì)胞系的抗體滴度對(duì)產(chǎn)品產(chǎn)量與生產(chǎn)成本的影響
閱讀:480 發(fā)布時(shí)間:2021-9-9
細(xì)胞系的抗體滴度與產(chǎn)品的產(chǎn)量與生產(chǎn)成本息息相關(guān),,實(shí)踐證明提高瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系和CHO細(xì)胞系的表達(dá)滴度可以提高抗體產(chǎn)量,,有效降低生產(chǎn)成本。
穩(wěn)定細(xì)胞系中的細(xì)胞表達(dá)滴度
穩(wěn)定生產(chǎn)細(xì)胞系生產(chǎn)過(guò)程中,,在可重復(fù)性和可放大性等多方面都具有許多優(yōu)勢(shì),。細(xì)胞的培養(yǎng)參數(shù)對(duì)細(xì)胞系的培育也具有較大的影響力。比如:溫度,、pH,、滲透壓、氣體流速,、罐內(nèi)壓力,、攪拌罐內(nèi)的攪拌槳類型、攪拌速度和細(xì)胞代謝物水平等,。另外,,在生物工藝技術(shù)中,細(xì)胞的密度,、細(xì)胞活性,、線粒體活性、LDH,、NADH水平等生物因素,,也會(huì)影響到蛋白質(zhì)合成、PTM等從而波及到產(chǎn)物的產(chǎn)量及品質(zhì)。
所以,,優(yōu)化細(xì)胞系的抗體滴度,,除了對(duì)宿主細(xì)胞系進(jìn)行設(shè)計(jì)改造外,細(xì)胞的培養(yǎng)參數(shù)優(yōu)化設(shè)計(jì),,對(duì)于提升細(xì)胞表達(dá)滴度,、滿足產(chǎn)品質(zhì)量要求也很重要,。
我們知道,,在抗體產(chǎn)品的產(chǎn)量是通過(guò)工藝放大來(lái)實(shí)現(xiàn),而生物工藝放大過(guò)程中又會(huì)受到很多因素的影響,。比如生物因素和細(xì)胞培養(yǎng)參數(shù)等,,生物反應(yīng)器容量體積等。所以在放大工藝生產(chǎn)中的各個(gè)環(huán)節(jié),,都需要嚴(yán)格把控,,此外還需要進(jìn)一步強(qiáng)化技術(shù)培訓(xùn)指導(dǎo),是工藝生產(chǎn)操作規(guī)范化,、標(biāo)準(zhǔn)化,,從而確保細(xì)胞的生產(chǎn)力與產(chǎn)品質(zhì)量的有效提升。
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中的細(xì)胞表達(dá)滴度
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞由于此類細(xì)胞構(gòu)建生產(chǎn)細(xì)胞系比較耗時(shí),,而且難度也較大,,故很少用于臨床或者商業(yè)規(guī)模化生產(chǎn),,比較適用于實(shí)驗(yàn)室小規(guī)模試驗(yàn),。在穩(wěn)定生產(chǎn)細(xì)胞系進(jìn)行規(guī)模化工藝放大生產(chǎn)時(shí),,有時(shí)也會(huì)使用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞放大到批次或補(bǔ)料分批生物反應(yīng)器工藝中,,以快速提升產(chǎn)品產(chǎn)量加速生產(chǎn)過(guò)程。目前,,一些細(xì)胞生產(chǎn)廠商也在嘗試提高瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞的表達(dá)滴度,。比如:這種工藝技術(shù)用于蛋白質(zhì)生產(chǎn)的轉(zhuǎn)染工藝和哺乳動(dòng)物表達(dá)載體進(jìn)行優(yōu)化,可使重組抗體的單位體積產(chǎn)量達(dá)到>0.5g/L,。國(guó)內(nèi)細(xì)胞生產(chǎn)商開發(fā)的CHO細(xì)胞高滴度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)具有高產(chǎn)量低成本等優(yōu)勢(shì),,已成為生產(chǎn)抗體類藥物廣泛應(yīng)用的工程細(xì)胞,而CHO細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是新藥研發(fā)過(guò)程中不可少的技術(shù)工藝,。
從長(zhǎng)遠(yuǎn)看來(lái),,提高瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞的抗體滴度在基因治療領(lǐng)域也很有意義。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是雖是產(chǎn)生高質(zhì)量載體的常用方法,,但規(guī)?;糯笊a(chǎn)仍然是基因制藥行業(yè)的一個(gè)重大挑戰(zhàn)。要想取得重大突破還需要更多的努力。在進(jìn)行MDCK細(xì)胞,、HEK293細(xì)胞培養(yǎng),CHO懸浮細(xì)胞培養(yǎng),、貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、微載體培養(yǎng),、微生物培養(yǎng),、高抗體滴度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)時(shí)也會(huì)面臨同樣的問(wèn)題。