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RIPA裂解液( 弱)

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更新時間:2025-03-24 14:36:35瀏覽次數(shù):436

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RIPA裂解液( 弱)是一種傳統(tǒng)的組織以及細(xì)胞快速裂解液,,主要用于從動物組織和哺乳動物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白,,可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞,。

詳細(xì)介紹

RIPA裂解液( 弱)
RIPA Lysis Buffer
Cat No:DY7021
 Size:100ml
         
產(chǎn)品組分       
  組分 Contents LY7021   
  RIPA裂解液 100ml   
         
儲運(yùn)條件       
 4℃保存,。
         
說    明       
 本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途,。  
產(chǎn)品簡介       
    RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織以及細(xì)胞快速裂解液,,主要用于從動物組織和哺乳動物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞,。按照其裂解液的強(qiáng)度可以分為強(qiáng),、中、弱三類,,具體特點(diǎn)和差異請參考附表2,,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇相應(yīng)產(chǎn)品。經(jīng)RIPA裂解液(弱)提取的蛋白可應(yīng)用于蛋白定量,、Western,、IP等,特別適合于CO-IP檢測,。
  RIPA裂解液裂解RIPA裂解液(弱)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),,150mM NaCl,1% NP-40,,0.25% sodium deoxycholate,,以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,,EDTA,,leupeptin等多種抑制劑,可以有效抑制蛋白降解,。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及注意事項(xiàng)      
 1.為防止蛋白降解,,所有的操作盡量在冰上進(jìn)行。
 2.使用RIPA裂解液得到的蛋白樣品,,可采用BCA法進(jìn)行蛋白定量,,以測定蛋白濃度。產(chǎn)品可單獨(dú)向本公司訂購,如:LY7052 BCA蛋白定量試劑盒,。本品含有高濃度的去垢劑,,不能用Bradford法進(jìn)行蛋白定量。
 3.建議在使用RIPA裂解液前,,向溶液中加入蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,,以防止蛋白降解,,或保持蛋白的磷酸化狀態(tài),。產(chǎn)品可單獨(dú)向本公司訂購,如:LY7150 蛋白酶抑制劑混合物,,LY7151 磷酸酶抑制劑混合物,。
 4.若需獲得更高濃度的蛋白,應(yīng)減少哺乳動物蛋白抽提試劑的使用量,。
 5. 對于培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞,,推薦先使用常規(guī)方法消化細(xì)胞,再參考懸浮細(xì)胞蛋白提取步驟操作,。
 6.對于離心獲得的細(xì)胞,,若不確定細(xì)胞體積,可根據(jù)細(xì)胞數(shù)量計算RIPA裂解液的使用量,。如5×106個Hela細(xì)胞約需加入500 μl RIPA裂解液,,以此類推。
RIPA裂解液( 弱)
RIPA Lysis Buffer
Cat No:LY7021
 Size:100ml
         
產(chǎn)品組分       
  組分 Contents LY7021   
  RIPA裂解液 100ml   
         
儲運(yùn)條件       
 4℃保存,。
         
說    明       
 本產(chǎn)品僅供科研使用,,請勿用于臨床診斷及其他用途。  
產(chǎn)品簡介       
    RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織以及細(xì)胞快速裂解液,,主要用于從動物組織和哺乳動物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白,,可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。按照其裂解液的強(qiáng)度可以分為強(qiáng),、中,、弱三類,具體特點(diǎn)和差異請參考附表2,,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇相應(yīng)產(chǎn)品,。經(jīng)RIPA裂解液(弱)提取的蛋白可應(yīng)用于蛋白定量、Western,、IP等,,特別適合于CO-IP檢測。
  RIPA裂解液裂解RIPA裂解液(弱)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),,150mM NaCl,,1% NP-40,0.25% sodium deoxycholate,以及sodium orthovanadate,,sodium fluoride,,EDTA,leupeptin等多種抑制劑,,可以有效抑制蛋白降解,。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及注意事項(xiàng)      
 1.為防止蛋白降解,所有的操作盡量在冰上進(jìn)行,。
 2.使用RIPA裂解液得到的蛋白樣品,,可采用BCA法進(jìn)行蛋白定量,以測定蛋白濃度,。產(chǎn)品可單獨(dú)向本公司訂購,,如:LY7052 BCA蛋白定量試劑盒。本品含有高濃度的去垢劑,,不能用Bradford法進(jìn)行蛋白定量,。
 3.建議在使用RIPA裂解液前,向溶液中加入蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,,以防止蛋白降解,,或保持蛋白的磷酸化狀態(tài)。產(chǎn)品可單獨(dú)向本公司訂購,,如:LY7150 蛋白酶抑制劑混合物,,LY7151 磷酸酶抑制劑混合物。
 4.若需獲得更高濃度的蛋白,,應(yīng)減少哺乳動物蛋白抽提試劑的使用量,。
 5. 對于培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞,推薦先使用常規(guī)方法消化細(xì)胞,,再參考懸浮細(xì)胞蛋白提取步驟操作,。
 6.對于離心獲得的細(xì)胞,若不確定細(xì)胞體積,,可根據(jù)細(xì)胞數(shù)量計算RIPA裂解液的使用量,。如5×106個Hela細(xì)胞約需加入500 μl RIPA裂解液,以此類推,。

 

 

 

                    表2 蛋白裂解液性能,、參數(shù)比較
 目錄號LY7001LY7020LY7021
 產(chǎn)品名稱RIPA裂解液(強(qiáng))RIPA裂解液(中) RIPA裂解液(弱) 
 有效裂解成分1%Triton X-100,
1% sodium
deoxycholate,,
0.1% SDS
1% NP-40,,
0.5% sodium
deoxycholate,
0.1% SDS
1% NP-40,,
0.25% sodium
deoxycholate
 裂解強(qiáng)度 強(qiáng)溫和
 膜蛋白提取很好較好 一般 
 胞漿蛋白提取 很好很好 很好
 核蛋白提取很好 較好較好
 主要用途 WB,,IPWB,IPWB,IP,,CO-IP

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