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本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:雞卵泡基膜細胞
組織來源:雞卵泡組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞簡介:
雞卵泡基膜分離自雞卵泡組織,;成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一,,卵泡腔很大,卵丘很明顯,。卵泡內(nèi)膜細胞緊靠卵泡顆粒層,,與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔,內(nèi)膜細胞呈多邊形,,胞質(zhì)清亮,,胞核圓形,細胞間可見許多毛細血管,,外膜細胞位于最外層,,多呈梭形,,與周圍結締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞,,在卵泡開始發(fā)育,、卵細胞成長的同時,周圍的菱形細胞變?yōu)榱⒎叫?,并由單層增生成復層,,因其細胞漿內(nèi)含有顆粒,故稱為顆粒細胞,。初級卵泡的顆粒細胞為單層,;次級卵泡的顆粒細胞增至復層;成熟卵泡的顆粒細胞展開又變?yōu)閱螌?。顆粒細胞的胞核大而圓,,著色深,細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部,。
方法簡介:
公司實驗室分離的雞卵泡基膜采用先機械分離后膠原酶反復消化法,、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的雞卵泡基膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細胞如何處理?
1,、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2 英文名稱: maix metalloproteinase 2 規(guī)格: 英文縮寫: MMP-2
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-3 英文名稱: maix metalloproteinase 3 規(guī)格: 英文縮寫: MMP-3
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9 英文名稱: maix metalloproteinase 9 規(guī)格: 英文縮寫: MMP-9
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基質(zhì)金屬蛋白酶21抗體
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FZD5 Protein Human 重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 標簽)
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雞卵泡基膜細胞大鼠不對稱二甲基精酸(ADMA)試劑盒 ,,英文名: ADMA ELISA Kit
Mouse p53 (p53) ELISA Kit 小鼠p53(p53)試劑盒
ELISA 小鼠多巴胺(mouse Dopamine) 進口分裝
CLIAKitforLBP(Humanlipolysaccharidebindingprotein)ELISAKit人脂多糖結合蛋白
通用型vero毒素大腸桿菌志賀氏毒素-2(VTEC-Shigatoxin2)試劑盒20次
ELISAKitLv/Vn紅螯光殼螯蝦卵黃脂0蛋白