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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
脂肪 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8283 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
雞脂肪干分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成 團(tuán) 的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉,；貯存的脂肪，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和 脂肪酸,，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用,。它們影響胰島素敏感性、血壓水平,、內(nèi)皮功能 ,、 纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過(guò)程,；脂肪組織已由過(guò)去單純作為能量?jī)?chǔ)存 的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng),。脂肪干細(xì)胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能 的干細(xì)胞，主要恢復(fù)組織細(xì)胞的修復(fù)功能,，促進(jìn)細(xì)胞的再生,，恢復(fù)年輕面容的同時(shí)，身體 機(jī)能也得到充分改善,，有效改善亞健康,、早衰等疾病，由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老,。脂 肪干細(xì)胞具有很多優(yōu)點(diǎn)：①具有自我更新及多向分化的潛能,；②來(lái)源充足；③對(duì)供區(qū)的創(chuàng) 傷較??；④獲得率及體外擴(kuò)增速率高。脂肪干細(xì)胞是目前被廣泛應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域中理 想的種子細(xì)胞,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞脂肪干采用膠原酶消化法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞脂肪經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不 含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS、EGF,、bFGF,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
雞脂肪干體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISAKit ELISA.
豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit ELISA.
豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISAKit ELISA.
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISAKit ELISA.
豬戊型肝病毒IgG(HEV-IgG)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
Human maix metalloproteinase 7 (MMP-7) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)試劑盒
Rabbitleoopichormone,LHELISAKit 兔子促黃體激素(LH)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAnnexinA2humancELISAKit人膜粘連蛋白Ⅱ試劑盒
血液二(MDA)比色法定量試劑盒50次
PorcineGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit豬生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)試劑盒
FITC標(biāo)記人CD13單克隆抗體
溶質(zhì)載體家族22成員14抗體
HA重組甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PDGF-R-B 血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B(抗原 0.5mgPDGF-R-B 血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B(抗原)
EDAR重組人 EDAR / DL 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BCL2L11 Protein Human 重組人 BCL2L11 / Bim 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PVR Protein Human 重組人 CD155 / PVR / NECL5 蛋白
PDGF-R-B 血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B(抗原 0.5mgPDGF-R-B 血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B(抗原)
BCL2L11 Protein Human 重組人 BCL2L11 / Bim 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PVR Protein Human 重組人 CD155 / PVR / NECL5 蛋白
EDAR重組人 EDAR / DL 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
雞脂肪干細(xì)胞大鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒 ,，英文名： IL-1β ELISA Kit
Rabbit maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-15(mouse IL-15) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-3(MouseIerleukin3)ELISAKit小鼠白介素3
通用型雞火雞支原體(MM)試劑盒20次
ELISAKitTAP大鼠原激活肽
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