詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
外周血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7028 |
細(xì)胞簡介:
雞外周血淋巴分離自外周血,;所謂的外周血,,即除骨髓之外的血液,,就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血,,它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細(xì)胞或未被釋放入循環(huán)的血細(xì)胞。外周血淋巴細(xì)胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡稱PBL,,主要是血液循環(huán)中的淋巴細(xì)胞,,由T細(xì)胞和B細(xì)胞組成,其中T細(xì)胞(占70%~80%)和B細(xì)胞(占20%~30%),。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞外周血淋巴采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞外周血淋巴經(jīng)過檢測,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔白細(xì)胞介素15試劑盒 兔白細(xì)胞介素15試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔白細(xì)胞介素15試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔白細(xì)胞介素15試劑盒、兔白細(xì)胞介素15試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔白介素17試劑盒 兔白介素17試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔白介素17試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔白介素17試劑盒,、兔白介素17 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒 兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒,、兔8-異構(gòu)前列腺素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔6前列腺素F1a試劑盒 兔6前列腺素F1a試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔6前列腺素F1a試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔6前列腺素F1a試劑盒、兔6前列腺素F1a 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human gasic carcinoma marker ELISA Kit 人胃癌標(biāo)志物試劑盒
HumanUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit 人高敏三甲狀腺原(u-T3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanComplemefragme4a,C4a試劑盒人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CDK1/CYCLINB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanproteolipidprotein,PLPELISAKit人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
S100鈣結(jié)合蛋白A8抗體
鉀通道相互作用蛋白3抗體
AHSG重組人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 蛋白 Protein
上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)重組蛋白 Recombinant Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)
IL31重組人 IL-31 / IL31 蛋白 Protein
ICAM2 Protein Human 重組人 ICAM-2 / CD102 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)重組蛋白 Recombinant Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)
ICAM2 Protein Human 重組人 ICAM-2 / CD102 蛋白
AHSG重組人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
IL31重組人 IL-31 / IL31 蛋白 Protein
雞外周血淋巴細(xì)胞大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒 ,,英文名: C4 ELISA Kit
Mouse alpha 1 acid glycoprotein (1-AGP) ELISA Kit 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒
ELISA 小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforKP(Humankaliureticpeptide)ELISAKit人利尿肽
通用型半胱(cysteine)含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitt-PA大鼠組織型纖溶酶原激活劑
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行