詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7039 |
細(xì)胞簡介:
雞小腸黏膜上皮分離自小腸組織,;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi),,上連胃幽門,下接盲腸,,分為十二指腸,、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液,、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過程,,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了,。小腸管壁由粘膜、粘膜下層,、肌層和漿膜構(gòu)成,。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,,絨毛根部的上皮下陷至固有層,,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切,;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞,、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞,。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化,、吸收和分泌及運(yùn)動功能,,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動的動力,,促使食物向下運(yùn)動,。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對病原微生物的道防線,。因此,,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用,。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生,、性質(zhì)和強(qiáng)度。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞小腸黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞小腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔補(bǔ)體蛋白3試劑盒 兔補(bǔ)體蛋白3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔補(bǔ)體蛋白3試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔補(bǔ)體蛋白3試劑盒,、兔補(bǔ)體蛋白3 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒 兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒,、兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
兔白細(xì)胞介素35試劑盒 兔白細(xì)胞介素35試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔白細(xì)胞介素35試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔白細(xì)胞介素35試劑盒、兔白細(xì)胞介素35 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
兔白細(xì)胞介素1試劑盒 兔白細(xì)胞介素1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔白細(xì)胞介素1試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔白細(xì)胞介素1試劑盒,、兔白細(xì)胞介素1試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠apelin 12(AP12)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat iercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒
HumanParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancomplemeconolprotein,CCP試劑盒人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織B-RAF激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanpulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)試劑盒規(guī)格:96T/48T
SC35蛋白抗體
減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體
CPE重組人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
內(nèi)皮素1(EDN1)重組蛋白 Recombinant Endothelin 1 (EDN1)
CCL18重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 Protein
HYOU1 Protein Human 重組人 ORP150 / HYOU1 / HSP12A 蛋白
NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP
內(nèi)皮素1(EDN1)重組蛋白 Recombinant Endothelin 1 (EDN1)
HYOU1 Protein Human 重組人 ORP150 / HYOU1 / HSP12A 蛋白
CPE重組人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP
CCL18重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 Protein
雞小腸黏膜上皮細(xì)胞大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒 ,,英文名: C3 ELISA Kit
Mouse alpha 1 microglobulin (alpha 1-MG) ELISA Kit 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒
ELISA 小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforKLR(Humankillercelllectin-likereceptor)ELISAKit人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體
通用型半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitTPA大鼠組織多肽抗原
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行