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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
主動(dòng)脈 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8286 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
雞主動(dòng)脈平滑肌分離自主動(dòng)脈組織；主動(dòng)脈是體循環(huán)的動(dòng)脈主干,。其運(yùn)行路徑為：升主動(dòng)脈起于左心室,，至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動(dòng)脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動(dòng)脈,；在第12胸椎體高度穿膈的主動(dòng)脈裂孔移行為腹主動(dòng)脈,，以上為胸主動(dòng)脈，至第4腰椎體下緣分為左,、右髂總動(dòng)脈,；髂總動(dòng)脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動(dòng)脈,。主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞在心血管疾病發(fā)生,、發(fā)展中具有重要作用，以主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象,，探討心血管疾病相關(guān)發(fā)病機(jī)制是目前研究的熱點(diǎn),；體外培養(yǎng)的主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞主動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞主動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
雞主動(dòng)脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
1:3000 25g
Pepsin1:3000,PorcineSource 100g
抑制劑 5mg
Pepstatin 25mg
小鼠蛋酸酯酶2B(PP-2B)試劑盒
Rat gelsolin (Gelsolin) ELISA Kit 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒
HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATM試劑盒人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)試劑盒
植物源性食品小麥(wheat)試劑盒20次
Humahrombusprecursorprotein,TpPELISAKit人血栓前體蛋白(TpP)試劑盒
FLJ38767蛋白抗體
乳腺癌膜蛋白11/前梯度同源蛋白3抗體
IL27重組小鼠 IL27 / Interleukin-27 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
防御素β124(DEFβ124)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 124 (DEFb124)
CDH2重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CCL21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白
防御素β124(DEFβ124)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 124 (DEFb124)
FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL27重組小鼠 IL27 / Interleukin-27 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CCL21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白
CDH2重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
雞主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞大鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒 ,，英文名： IL-1α ELISA Kit
Mouse epidermal growth factor (EGF) ELISA Kit 小鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-18(mouse IL-18) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-3ELISAKit大鼠白介素3
通用型雞鼠氏菌(ST)試劑盒20次
ELISAKitNOS大鼠合成酶
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