二手安捷倫1200液相色譜儀基本原理    一,、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?ensp; 1. 了解高效液相色譜法分離的基本原理,； 2. 了解高效液相色譜儀的基本構(gòu)造； 3. 了解高效液相色譜儀的基本操作,。 

二,、基本原理  高效液相色譜（HPLC）法是以高壓下的液體為流動相,，并采用顆粒極細(xì)的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。高效液相色譜對樣品的適用性廣,，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,，因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。

二手安捷倫1200液相色譜儀分析原理：  （一）高效液相色譜分析的流程：由泵將儲液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng),，然后輸出,，經(jīng)流量與壓力測量之后，導(dǎo)入進(jìn)樣器,。被測物由進(jìn)樣器注入,，并隨流動相通過色譜柱，在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測器,，檢測信號由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理,，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶,。遇到復(fù)雜的混合物分離（極性范圍比較寬）還可用梯度控制器作梯度洗脫,。 （二）高效液相色譜的分離過程：同其他色譜過程一樣，HPLC也是溶質(zhì)在固定相和流動相之間進(jìn)行的一種連續(xù)多次交換過程,。它借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù),、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離,。

開始樣品加在柱頭上,，假設(shè)樣品中含有３個組分，Ａ,、Ｂ和Ｃ,，隨流動相一起進(jìn)入色譜柱，開始在固定相和流動相之間進(jìn)行分配,。分配系數(shù)小的組分Ａ不易被固定相阻留,，較早地流出色譜柱。分配系數(shù)大的組分Ｃ在固定相上滯留時間長,，較晚流出色譜柱,。組分Ｂ的分配系數(shù)介于Ａ，Ｃ之間,，第二個流出色譜柱,。若一個含有多個組分的混合物進(jìn)入系統(tǒng)，則混合物中各組分按其在兩相間分配系數(shù)的不同先后流出色譜柱,，達(dá)到分離之目的,。

不同組分在色譜過程中的分離情況，首先取決于各組分在兩相間的分配系數(shù),、吸附能力,、親和力等是否有差異,，這是熱力學(xué)平衡問題，也是分離的首要條件,。其次，當(dāng)不同組分在色譜柱中運(yùn)動時,，譜帶隨柱長展寬,，分離情況與兩相之間的擴(kuò)散系數(shù)、固定相粒度的大小,、柱的填充情況以及流動相的流速等有關(guān),。所以分離終效果則是熱力學(xué)與動力學(xué)兩方面的綜合效益。

 三,、系統(tǒng)構(gòu)成  1.主機(jī)：Waters Allance 2695高效液相色譜儀,分為①分離單元Allance2695,；②紫外－可見檢測器2487；③熒光檢測器2474,；④示差折光檢測器2414,。 2.操作控制系統(tǒng)：DELL Dimmsen 4550微機(jī)；Waters Millunnium32 V4.0 色譜管理器軟件,。