圖1. 姜黃鈉的合成,。a. 用姜黃素和碳酸氫鈉合成姜黃素鈉（Cur-Na）的過程。姜黃素分子中酚羥基的H+被Na+取代（紅色橢圓）,，而姜黃素中的羰基鍵發(fā)生酮-烯醇互變異構(gòu)（藍色橢圓）,。b. 姜黃素和Cur-Na的1H-NMR光譜，顯示了合成過程中發(fā)生的化學性質(zhì)的代表性變化。藍色陰影區(qū)域表示酚羥基的特征共振（δ=9.65ppm）,。綠色陰影是烯烴信號（δ=5.93ppm）,，表明C=C雙鍵的形成。
圖2. 生物墨水的物化性質(zhì),。添加了不同濃度光抑制劑的生物墨水（PEG-GelMA/LAP）的儲能模量（G'反映材料的剛度）和損失模量（G''反映材料粘度）隨時間的變化：a.檸檬黃和b. Cur-Na,。G'和G'之間的交叉點被稱為凝膠點，而凝膠時間被定義為曝光開始至凝膠點的時間（在該研究中約為20秒）,。生物墨水在405nm,、13mW cm?2的光照下曝光30s。陰影區(qū)域表示曝光時間,。c. 水凝膠的應(yīng)力-應(yīng)變曲線,。d. 三種水凝膠在~20%應(yīng)變下的彈性模量。三種生物墨水的e. 溶脹比和f. 溶膠分數(shù)對比,。
圖3. Cur-Na抑制散射效應(yīng)的機制,。a. 示意圖顯示了當光穿透生物墨水時光強的高斯分布以及不同情況下產(chǎn)生的固化區(qū)域，包括無散射,、有散射,、與細胞混合的生物墨水和添加Cur-Na的生物墨水。Cd和Cw分別是固化深度和固化寬度,。E0表示生物墨水表面的光強度,，而EC是引發(fā)聚合所需的臨界能量。b. Cur-Na自由基鏈生長聚合的動力學過程由三個階段控制：（1）引發(fā),、（2）鏈傳播,、（3）（4）終止。ki,，kp,，ktc和ktd分別是四種反應(yīng)中的速率常數(shù)。每個Cur-Na與三個自由基（R·）反應(yīng),，引發(fā)聚合物鏈生長,，形成單體（M）。激活后的單體可以與其他單體反應(yīng),，聚合物鏈通過傳播而增長,，形成Mn·和Mm·。當鏈傳播通過終止反應(yīng)終止時,，形成聚合物（Mn和Mm）,。c. Cur-Na和PEGDA聚合過程中官能團的轉(zhuǎn)化率與時間的關(guān)系。散射區(qū)域的自由基可以被Cur-Na快速消耗,；水凝膠單體由于缺乏自由基而難以在散射區(qū)域形成聚合物,。
圖4. 水平方向打印精度分析,。a. 輻條狀圖案用于評估打印精度，從中心到外圍相鄰輻條之間的間隙增加,。打印精度被定義為模糊區(qū)域直徑（紅色虛線圓圈）與輻條狀圖案直徑的比值,。b. 載細胞結(jié)構(gòu)的熒光染色圖。c. 打印結(jié)構(gòu)的顯微圖像,，顯示了純PEG-GelMA生物墨水（上）和添加了檸檬黃（中）和Cur-Na的生物墨水（下）的模糊區(qū)域（紅色虛線圓圈）大小與相對曝光能量的關(guān)系,。Er指相對能量，定義為實際光能與單位曝光量的比,。d. 模糊區(qū)域大小與曝光能量的定量關(guān)系,。e. Cur-Na的高精度打印窗口，灰色,、紅色,、藍色區(qū)域分別代表含1mM、2mM,、3mM Cur-Na生物墨水的打印窗口寬度,。f. 載細胞打印結(jié)構(gòu)的模糊區(qū)域大小與曝光能量之間的定量關(guān)系。
圖5. 多層打印中的中空通道打印性分析與評定高保真度的打印誤差分析,。a. 具有不同直徑（D=300,、500和700μm）通道的圓柱體的3D CAD設(shè)計。H表示圓柱體的高度,，而h1,、h2和h3是通道的中空部分。打印精度定義為中空部分與通道總長度之間的比率,。b. 連續(xù)層打印中的散射效應(yīng)及其引起的過固化現(xiàn)象,。c-e. 打印精度隨圓柱體直徑的高度和通道直徑的關(guān)系。f. 具有不同直徑的多通道結(jié)構(gòu)CAD設(shè)計,。g. 分別使用含Cur-Na和檸檬黃的生物墨水打印的樣品,。h. 通道的實際直徑與設(shè)計直徑間的差異,。
圖6. Cur-Na在打印生物醫(yī)學應(yīng)用中常用的復(fù)雜三維結(jié)構(gòu)時的分辨率和高保真度,。a. 脊髓支架。它的結(jié)構(gòu)特點呈現(xiàn)不規(guī)則的通道和薄壁網(wǎng)絡(luò),，模仿脊髓的內(nèi)部結(jié)構(gòu),。使用兩種類型的水凝膠成功地制備了支架：PEG-GelMA（10%）和甲基丙烯酸縮水甘油酯改性的絲素蛋白（Sil-MA（15%））。b. 具有多個分支,、可灌注通道（200-800μm）和薄壁（~100μm）的血管網(wǎng)絡(luò),。通過注射有色染料溶液進行灌注。c. 具有獨,。特拓撲特征（曲面,、高孔隙率和連通性）的gyroid支架,。d. 打印載HepG2細胞的gyroid支架并培養(yǎng)14天，展現(xiàn)了良好的細胞增殖效果,。
圖7. 基于PC-12細胞體外培養(yǎng)的Cur-Na 細胞相容性評價,。a. 細胞活死染色熒光圖展示了細胞14天的活力（綠色：活細胞；紅色：死細胞）,。b. CCK-8測定細胞增殖情況,。細胞在支架中增殖14天，PEG-GelMA/Cur-Na水凝膠中的細胞展現(xiàn)出最,。,。好的增殖效果。c. 使用PEG-GelMA/Cur-Na水凝膠制造的通道支架（直徑200μm）的熒光圖像顯示了均勻的細胞分布,。最后一張圖像顯示了細胞沿著通道的生長情況,。d. 第1、7和14天脊髓支架中通道的共聚焦圖像,。e. 熒光圖像顯示種植在PEG-GelMA/Cur-Na支架表面的PC-12細胞的分化和突起形成（第7天）,。Tuj-1：Beta3-微管蛋白；DAPI：4’,，6-二胺基-2苯基吲哚,。
結(jié)論
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