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活細(xì)胞成像系統(tǒng)在實際應(yīng)用上有哪些功能？
閱讀：833 發(fā)布時間：2020-9-15
活細(xì)胞成像系統(tǒng)是用于活細(xì)胞長時間,、高清晰度,、高靈敏度成像的設(shè)備。當(dāng)用活細(xì)胞染料標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)特定生物大分子,，或者使用熒光蛋白標(biāo)記體內(nèi)特定蛋白時,，使用該熒光染料或者熒光分子特定的激發(fā)光線激發(fā)，通過探測其特用的發(fā)射光線即可探測到該生物大分子,?；罴?xì)胞成像系統(tǒng)一方面控制細(xì)胞生存的外部環(huán)境，提供合適的溫度,、適度和pH,，讓細(xì)胞處于好的狀態(tài)。另外一方面通過高靈敏度CCD捕捉細(xì)胞中的微弱熒光，長時間觀察細(xì)胞中的熒光分子的運(yùn)動,，具體揭示細(xì)胞間或細(xì)胞內(nèi)生物大分子的變化過程,。
主要用途：
針對活細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境的條件下，進(jìn)行顯微成像采集定時拍攝,，在白光或熒光下觀測活細(xì)胞的增殖細(xì)胞遷移粘附等等進(jìn)行細(xì)胞分析成像,；實現(xiàn)在細(xì)胞水平上的定性和定量分析、活細(xì)胞圖像處理,、活細(xì)胞動態(tài)示蹤,。在分子水平，可做到基因定位定量表達(dá)的動態(tài)分析,、蛋白質(zhì)合成降解運(yùn)輸和相互作用的動態(tài)研究,、細(xì)胞骨架的代謝動力學(xué)測定和細(xì)胞周期各時相的動態(tài)觀察等。
活細(xì)胞成像系統(tǒng)的主要功能為：
1,、多維成像：目前可以做到六維成像,。通過光學(xué)切片技術(shù)，實現(xiàn)對樣品的3D觀察,，構(gòu)建樣品的立體結(jié)構(gòu),。
2、3D還原型反卷積處理：顯微鏡的分辨率和圖像的對比度取決于物鏡收集的光學(xué)信息,。顯微鏡光路中衍射和折射現(xiàn)象的存在,，使得樣品信號的位置和強(qiáng)度都發(fā)生了變化，降低了系統(tǒng)的分辨率和圖像的質(zhì)量,。API作為對圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行反卷積處理早的實踐者，將顯微鏡的硬件設(shè)計和后期軟件處理結(jié)合在一起,，通過對光學(xué)信號的3D還原型反卷積處理,，大大提高了顯微鏡的靈敏度和分辨率。
3,、延時攝影： 通過軟件jing確的控制,，拍攝的時間間隔從數(shù)秒到數(shù)小時不等，在長時間拍攝下也不會造成熒光信號的淬滅,。根據(jù)實驗需求的不同,，無論單一層面還是三維結(jié)構(gòu)，都可以獲得良好的效果,。
4,、高速離子成像：結(jié)合高速CCD和高效的光路，在512×512像素下仍然可以實現(xiàn)21幀/秒的成像速度,。對于快速的離子濃度的變化,，zui快可以50-100幀/秒的速度獲取圖像。
5,、熒光共定位分析：通過比較多個熒光通道的定位情況,，即可知道他們在空間上和時間上的分布信息,，進(jìn)而得到相應(yīng)的熒光信號是否存在相互作用、協(xié)同運(yùn)動,、定向運(yùn)輸?shù)取?/div>
6,、熒光共振能量轉(zhuǎn)移：DeltaVision特制的活細(xì)胞濾片組保證CFP/YFP，GFP/mCherry（RFP）熒光強(qiáng)度的jing確記錄,，并進(jìn)一步計算出蛋白對之間jing確的能量轉(zhuǎn)移系數(shù),。