Curiosis血細胞計數(shù)板在操作上主要要以下五個步驟
閱讀:2908 發(fā)布時間:2020-9-10
利用Curiosis血細胞計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù),,是一種常用的微生物計數(shù)方法。此法的優(yōu)點是直觀,、快速,。將經(jīng)過適當(dāng)稀釋的菌懸液放在Curiosis血細胞計數(shù)板載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中,在顯微鏡下進行計數(shù),。由于計數(shù)室的容積是一定的(0.1或0.4mm2),,所以可以根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來換算成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。由于此法計得的是活菌體和死菌體的總和,,故又稱為總菌計數(shù)法,。適用于稀釋的菌懸液,即液體培養(yǎng)基中菌體的計數(shù),。
Curiosis血細胞計數(shù)板的操作步驟:
1,、稀釋:將釀酒酵母菌懸液進行適當(dāng)稀釋,菌液如不濃,,可不必稀釋,。
2、鏡檢計數(shù)室:在加樣前,,先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢,。若有污物,則需清洗后才能進行計數(shù),。
3,、加樣品:將清潔干燥的Curiosis血細胞計數(shù)板蓋上蓋玻片,再用無菌的細口滴管將稀釋的釀酒酵母菌液由蓋玻片邊緣滴一小滴,,讓菌液沿縫隙靠毛細滲透作用自行進入計數(shù)室,一般計數(shù)室均能充滿菌液,。注意不可有氣泡產(chǎn)生,。
4,、顯微鏡計數(shù):靜止5分鐘后,將Curiosis血細胞計數(shù)板置于顯微鏡載物臺上,,先用低倍鏡找到計數(shù)室所在位置,,然后換成高倍鏡進行計數(shù)。在計數(shù)前若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀,,需重新調(diào)節(jié)稀釋度后再計數(shù),。一般樣品稀釋度要求每小格內(nèi)約有5—10個菌體為宜。每個計數(shù)室選4或5個中格中的菌體進行計數(shù),。
鏡檢計數(shù)方法:
a,、方格內(nèi)細胞的計數(shù)順序為左上→右上→右下→左下;
b,、壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的細胞數(shù),;
c、酵母細胞若有粘連,, 要數(shù)出團塊中的每一個細胞,;
d、出芽酵母的芽體體積若超過細胞體積的1/2,,則算獨立個體,;
e、計數(shù)總數(shù)不少于300個細胞,。
5,、清洗Curiosis血細胞計數(shù)板:使用完畢后,將Curiosis血細胞計數(shù)板在水籠頭上用水柱沖洗,,切勿用硬物洗刷,,洗完后自行晾干或用吹風(fēng)機吹干。鏡檢,,觀察每小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物,。若不干凈,則必須重復(fù)洗滌至干凈為止,。