使用步驟

使用前請先在漂洗液 Buffer PW 中加入 12 mL 無水乙醇,。1.將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下 (盡量切除多余部分)放入干凈的離心管中，稱取凝膠重量(去除空管重量),，100 mg凝膠等同于 100 L體積,，作為一個凝膠體積注:若回收的 DNA 片用于克隆，須避免紫外照射損傷 DNA,。盡量減少紫外暴露時間,。

2.向膠塊中加入 1 倍體積 Buffer PE(如果凝膠重為 0.1g,，則加入100 uL Buffer PE)。50-60C水浴溶膠5-10 min,，期間溫和地上下翻轉離心管,，以確保膠塊充分溶解。(若膠塊的體積過大,，可事先將膠塊切成碎塊,。)

3.將上一步所得溶液加入一個吸附柱中，室溫放置 1min,，12,000rpm 離心 1min,，棄廢液，將吸附柱放回收集管中,。注:吸附的容量為750L,，若上步得到的液大于 750L，可分批加入,。

4.在吸附柱中加入 300 uL Buffer PE,，12,000 rpm 離心 1 min，棄廢液,，將吸附柱放回收集管中,。

5.在吸附柱中加入 700 uL Bufer PW(確認已加入無水乙醇)，12,000rpm 離心 1min,，棄廢液，將吸附柱放回收集管中,。

6.重復一次步驟 5,。

7.吸附柱放回收集管后，12.000 rpm 離心 2 min,，盡量除盡漂洗液注意:可將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘,，以防止殘留的乙醇影響后續(xù)的酶反應(酶切PCR等)實驗。

8.將吸附柱放入干凈的 1.5 mL 離心管中,，開蓋室溫靜置 5 min,。向吸附膜中間位置加入 30 uL Buffer PB 或 ddHO (洗脫液應先放置于水浴鍋中預熱) ，室溫放置 2 min,，12,000 rpm 離心2 min,，收集DNA 溶液。

注意:洗脫體積不應小于30 l,，體積過少影回收率,。為了提高 DNA 的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,，12,000 rpm 離心 2 min,，將DNA 液收集到離心管中,。回收大于3 KB 片,，建議 BuflerPB 預熱至55 C以提升回收效率,。DNA 也可以用 ddH0 洗脫。DNA 產(chǎn)應保存在-20C以防DNA 降解,。