當前位置:安諾倫(北京)生物科技有限公司>>分子生物學平臺>>蛋白-核酸/RNA-DNA研究>> 免疫共沉淀
產地類別 | 國產 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
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免疫共沉淀(Co-lmmunoprecipitation) 是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相
互作用的經典方法,。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法,。
其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被
保留了下來,。如果用蛋白質X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內結合的蛋白質Y也能沉淀下來。目前多用
精制的prorein A預先結合固化在argarose的beads上,,使之與含有抗原的溶液及抗體反應后,,beads. 上的
prorein A就能吸附抗原達到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;也可用于
確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔,。
基本流程是:細胞裂解液中加入抗體,,與抗原形成特異免疫復合物,經過洗脫,,收集免疫復合物,,然
后進行SDS-PAGE及Western blotting分析。
服務流程:
1.構建含有目的基因的表達質粒
2.共轉細胞
3.裂解細胞并加入誘餌蛋白的抗體,孵育
4.加入protein A或G以與抗體特異性結合于Agarose珠
5. SDS-PAGE; Western Blot
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