MTT是一種粉末狀化學(xué)試劑3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,，中文為 3-(4,，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽,，是一種黃顏色的染料,。

MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法,。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中,，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚,，用酶聯(lián)免疫檢測儀在540 或720nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量,。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi),，MTT結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測,、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選,、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高,、經(jīng)濟,。

主要實驗流程為：

1. 接種細胞：用含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個細胞懸液,，以每孔1000-10000個細胞接種到96孔板，每孔體積200ul,。

2. 培養(yǎng)細胞：同一般培養(yǎng)條件,，培養(yǎng)3-5天（可根據(jù)試驗?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時間）。

3. 呈色：培養(yǎng)3-5天后,，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS配制,，pH=7.4)20ul.繼續(xù)孵育4 h，終止培養(yǎng),，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液,，對于懸浮細胞需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ulDMSO,，振蕩10min,，使結(jié)晶物充分融解。

4. 比色：選擇490nm波長,，在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值,，記錄結(jié)果，以時間為橫坐標,，吸光值為縱坐標繪制細胞生長曲線,。