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當(dāng)前位置:安諾倫(北京)生物科技有限公司>>抗體工程>>重組抗體制備>> 重組IgG制備
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所 在 地北京市
更新時(shí)間:2020-05-12 14:09:52瀏覽次數(shù):1492次
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隨著重組蛋白技術(shù)的進(jìn)一步完善,真核哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)憑著蛋白折疊和完善的翻譯后休息系統(tǒng),,表達(dá)的抗體更接近天然構(gòu)象,,從而具有和天然抗體相同的生物活性,因此常用于功能蛋白,、抗體及臨床疫苗的生產(chǎn),。艾柏森生物提供工業(yè)級(jí)別重組IgG、Fab和ScFv等抗體片段的制備和純化服務(wù),。
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá)
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染(transienttransfection)是將重組抗體基因?qū)胝婧思?xì)胞的方式之一,。在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中,重組DNA導(dǎo)入感染性強(qiáng)的細(xì)胞系以獲得目的基因暫時(shí)但高水平的表達(dá),。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合到宿主染色體,,可在比穩(wěn)定轉(zhuǎn)染較短時(shí)間內(nèi)收獲轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,并對(duì)溶解產(chǎn)物中目的基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),。艾柏森提供從基因優(yōu)化,、載體構(gòu)建、瞬轉(zhuǎn)HEK293細(xì)胞/CHO細(xì)胞,、表達(dá)純化小試以及大規(guī)模發(fā)酵服務(wù),。可以短時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)mg至g級(jí)重組IgG,。
構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系
構(gòu)建目的基因的表達(dá)質(zhì)粒后,,可通過(guò)電轉(zhuǎn)、慢病毒轉(zhuǎn)染等方法,,將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至宿主細(xì)胞,。選用DHFR /GS基因表達(dá)系統(tǒng),將轉(zhuǎn)染的細(xì)胞培養(yǎng)在合適的選擇性培養(yǎng)基中,,然后進(jìn)行MTX/MSX壓力篩選,以產(chǎn)生穩(wěn)定細(xì)胞庫(kù)。
艾柏森生物使用MolecularClonePix2系統(tǒng),高通量,、自動(dòng)化的篩選出100-200個(gè)高水平分泌克隆,,并從中挑選10-20個(gè)高產(chǎn)克隆,進(jìn)行下一步的穩(wěn)定性測(cè)試,。我們挑選出10個(gè)克隆,,進(jìn)行10次傳代后,qPCR和WB法檢測(cè)細(xì)胞株的穩(wěn)定性,。我們提供序列及載體報(bào)告, 3株表達(dá)的細(xì)胞株,,表達(dá)分析、穩(wěn)定性測(cè)試報(bào)告以及詳細(xì)的穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建報(bào)告,。
IgG構(gòu)建服務(wù)簡(jiǎn)介
VL和VH基因片段的密碼子優(yōu)化和基因合成
表1 噬菌體展示技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目:IgG的重組表達(dá)生產(chǎn)
服務(wù)描述 | 數(shù)量 | 服務(wù)周期 | 價(jià)格 |
VL和VH基因片段的密碼子優(yōu)化和基因合成 | 1 | 6周 | ¥16000 |
全抗體重組表達(dá)載體的構(gòu)建 | 1 | ||
瞬時(shí)表達(dá)(293/CHO細(xì)胞) | 1 | ||
ELISA,、WB檢測(cè) | 1 | ||
抗體制備和純化(1.0mg) | 1 | ||
附加抗體制備和純化(¥3600/mg) | N/A | TBD | TBD |
總計(jì): | 1.5 月 | ¥16000 | |
注:可提供VH和VL的cDNA中片段(pcDNA3載體表達(dá),¥1800/克?。?; 客戶(hù)需支付80%的預(yù)付款。
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