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雜交瘤細胞系

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更新時間:2020-05-12 11:07:40瀏覽次數(shù):1340次

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雙特異性抗體(bispecificantibody,BsAb),擁有兩個不同的抗原結(jié)合位點,,從而同時與兩個靶抗原結(jié)合,在發(fā)揮抗體靶向性的同時,,介導(dǎo)另外一種特殊的功能,例如一個結(jié)合靶細胞上的特異抗原,,另一個結(jié)合淋巴細胞或者吞噬細胞等效應(yīng)細胞,,從而在腫瘤診斷及治療過程中發(fā)揮傳統(tǒng)抗體*的優(yōu)勢。

雙特異性抗體(bispecificantibody,BsAb),擁有兩個不同的抗原結(jié)合位點,,從而同時與兩個靶抗原結(jié)合,,在發(fā)揮抗體靶向性的同時,介導(dǎo)另外一種特殊的功能,,例如一個結(jié)合靶細胞上的特異抗原,,另一個結(jié)合淋巴細胞或者吞噬細胞等效應(yīng)細胞,從而在腫瘤診斷及治療過程中發(fā)揮傳統(tǒng)抗體*的優(yōu)勢,。雙特異性抗體是一種工程化的抗體類蛋白產(chǎn)物,,在自然情況下是不會產(chǎn)生的,只能通過化學(xué)或者生物學(xué)的方法來制備,,利用DNA重組及細胞融合的技術(shù)來實現(xiàn),。通過雜交瘤細胞系來制備雙特異性抗體是早使用的一種方法,在目前也常用來制備單克隆抗體藥物開發(fā),。但是這種技術(shù)有天然的缺陷,,由于重鏈和輕鏈的隨機重組,兩種針對不同抗原的抗體重組有以下10種形式,,但只有一種是需要的,。

 

<strong><strong>雜交瘤細胞系</strong></strong>; QUADROMA CELL LINES

 

艾柏森生物提供雙特異性抗體定制服務(wù),可以滿足客戶不同的需求,。

技術(shù)流程

1. 選擇標(biāo)記物的引入:雜交瘤細胞系需要引入突變以便篩選,。HAT敏感的雜交瘤細胞能在含有8-氮鳥嘌呤藥物的培養(yǎng)基中存活。

2. 流式細胞儀篩選雜交瘤細胞

3. 細胞融合:使用聚乙二醇或者電誘導(dǎo)細胞融合,。

4. 從雜交瘤培養(yǎng)液中篩選特異性抗體:ELISA,,流式細胞儀和細胞毒性是常用的篩選方法

5. 克隆:篩選穩(wěn)定分泌bsAb的細胞系,,再進行單克隆細胞培養(yǎng),,常用的方法為有限稀釋法。

6. 雙特異性抗體的純化:通常使用蛋白A或蛋白G親和色譜法與離子交換色譜或排阻色譜合并來純化雙特異性抗體,bsAb的純度可以通過SDS-PAGE,,等電聚焦,,Western-blot,同型特異性的ELISA來評估,。

 

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