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所 在 地北京市
更新時(shí)間:2020-05-12 11:07:40瀏覽次數(shù):1341次
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雙特異性抗體(bispecificantibody,BsAb),擁有兩個(gè)不同的抗原結(jié)合位點(diǎn),從而同時(shí)與兩個(gè)靶抗原結(jié)合,,在發(fā)揮抗體靶向性的同時(shí),,介導(dǎo)另外一種特殊的功能,例如一個(gè)結(jié)合靶細(xì)胞上的特異抗原,,另一個(gè)結(jié)合淋巴細(xì)胞或者吞噬細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞,,從而在腫瘤診斷及治療過程中發(fā)揮傳統(tǒng)抗體*的優(yōu)勢。雙特異性抗體是一種工程化的抗體類蛋白產(chǎn)物,,在自然情況下是不會產(chǎn)生的,,只能通過化學(xué)或者生物學(xué)的方法來制備,利用DNA重組及細(xì)胞融合的技術(shù)來實(shí)現(xiàn),。通過雜交瘤細(xì)胞系來制備雙特異性抗體是早使用的一種方法,,在目前也常用來制備單克隆抗體藥物開發(fā)。但是這種技術(shù)有天然的缺陷,,由于重鏈和輕鏈的隨機(jī)重組,,兩種針對不同抗原的抗體重組有以下10種形式,但只有一種是需要的,。
艾柏森生物提供雙特異性抗體定制服務(wù),,可以滿足客戶不同的需求。
技術(shù)流程
1. 選擇標(biāo)記物的引入:雜交瘤細(xì)胞系需要引入突變以便篩選,。HAT敏感的雜交瘤細(xì)胞能在含有8-氮鳥嘌呤藥物的培養(yǎng)基中存活,。
2. 流式細(xì)胞儀篩選雜交瘤細(xì)胞
3. 細(xì)胞融合:使用聚乙二醇或者電誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
4. 從雜交瘤培養(yǎng)液中篩選特異性抗體:ELISA,,流式細(xì)胞儀和細(xì)胞毒性是常用的篩選方法
5. 克?。汉Y選穩(wěn)定分泌bsAb的細(xì)胞系,再進(jìn)行單克隆細(xì)胞培養(yǎng),,常用的方法為有限稀釋法,。
6. 雙特異性抗體的純化:通常使用蛋白A或蛋白G親和色譜法與離子交換色譜或排阻色譜合并來純化雙特異性抗體,bsAb的純度可以通過SDS-PAGE,,等電聚焦,,Western-blot,同型特異性的ELISA來評估,。
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