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中級會(huì)員 | 第6年

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阿爾茨海默病(AD)動(dòng)物模型

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更新時(shí)間:2025-02-21 15:40:31瀏覽次數(shù):102次

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阿爾茨海默?。ˋD)動(dòng)物模型造模方法:小鼠經(jīng)3%戊巴bi妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉,,固定于腦立體定位儀,暴露前鹵,,參照腦立體定位圖譜,,每只小鼠右側(cè)腦室注射3μl Aβ25-35(2μg/μl)。坐標(biāo)為前鹵后1.2mm,,矢狀縫右側(cè)旁開1.2mm,,即為側(cè)腦室的體表部位,進(jìn)針深度為顱骨表面向下3.2mm,;注射時(shí)進(jìn)針1μl/min,,注射后留針8min,拔針時(shí)速度為1mm/min,。

    動(dòng)物類型:昆明小鼠

    造模試劑(1)Aβ25-35

    造模方法:小鼠經(jīng)3%戊巴bi妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉,,固定于腦立體定位儀,暴露前鹵,,參照腦立體定位圖譜,,每只小鼠右側(cè)腦室注射3μl Aβ25-352μg/μl)。坐標(biāo)為前鹵后1.2mm,,矢狀縫右側(cè)旁開1.2mm,,即為側(cè)腦室的體表部位,進(jìn)針深度為顱骨表面向下3.2mm,;注射時(shí)進(jìn)針1μl/min,,注射后留針8min,拔針時(shí)速度為1mm/min,。

    造模試劑(2)AlCl3

    造模方法:小鼠右側(cè)腦室內(nèi)注射3μl AlCl32.5%),,注射坐標(biāo)方法同上。

    造模試劑(3):海馬物理損傷

    造模方法:小鼠固定于腦立體定位儀,坐標(biāo)為前鹵后2.4mm,,矢狀縫右旁開2.0mm,,使用自制彎曲的9號針頭垂直插入兩側(cè)海馬,順時(shí)針轉(zhuǎn)一周,,進(jìn)針深度為顱骨表面向下3mm,。

    直接購買AD轉(zhuǎn)基因小鼠(4)

    轉(zhuǎn)基因模型可分為:APP轉(zhuǎn)基因模型,PS-1轉(zhuǎn)基因模型,,ApoE4轉(zhuǎn)基因模型,,tau蛋白轉(zhuǎn)基因模型,雙重和三重轉(zhuǎn)基因模型

    造模方法:各轉(zhuǎn)基因動(dòng)物AD模型制作方法和原理基本相同,,以APP轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型為例:

    從人類cDNA文庫可獲取h-APP基因cDNA可表達(dá)片段,,在5’端連接合適的啟動(dòng)子,3’端連接SV40及其PolyA尾既構(gòu)成外源h-APP基因,。H-APP基因經(jīng)體外擴(kuò)增,,裂解純化去除質(zhì)粒序列后,通過一定的方法直接注入小鼠受精卵或早期胚胎細(xì)胞核內(nèi)使之穩(wěn)定地整合于染色體內(nèi),,將該受精卵或胚胎細(xì)胞植入假孕母子宮或輸卵管內(nèi)發(fā)育成熟,即可獲得穩(wěn)定表達(dá)外源h-APP基因的基因鼠


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