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銀染法實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

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更新時(shí)間:2024-06-17 13:45:39瀏覽次數(shù):546次

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銀染法是一種用于檢測蛋白質(zhì)或核酸的生物化學(xué)技術(shù),其基本原理涉及銀離子的化學(xué)反應(yīng),。

銀染法是一種用于檢測蛋白質(zhì)或核酸的生物化學(xué)技術(shù),,其基本原理涉及銀離子的化學(xué)反應(yīng),。以下是銀染法原理的詳細(xì)介紹:

· 銀染法中,,銀離子與DNA或蛋白質(zhì)結(jié)合,。

· 在堿性pH環(huán)境下,,還原劑如甲醛將銀離子還原成金屬銀,,這些銀顆粒沉淀在蛋白質(zhì)或DNA的表面上,從而顯色,。

· 由于銀染具有很高的靈敏度,,它能夠檢測到凝膠上低于1ng/蛋白質(zhì)點(diǎn)的物質(zhì),因此廣泛應(yīng)用于2D凝膠分析和極低蛋白含量的測定中,。

此外,,銀染中的蛋白質(zhì)吸光度與濃度之間的關(guān)系可用于研究蛋白質(zhì)的某些特殊基團(tuán),如含硫氨基酸在銀染中的作用表明,,不含或只含少量gas殘基的蛋白質(zhì)有時(shí)會呈現(xiàn)負(fù)染,。

銀染法實(shí)驗(yàn)步驟如下:

1. 固定:將凝膠放入約100ml固定液中,室溫?fù)u動(dòng)20分鐘或40分鐘以上甚至過夜,。

2. 洗滌:棄去固定液,,加入100ml 30%乙醇或100ml 10%甲醇,室溫?fù)u動(dòng)10分鐘,。

3. 增敏:加入100ml銀染增敏液(1X)或100ml銀溶液(1X),,室溫?fù)u動(dòng)2分鐘。

4. 洗滌:棄去增敏液,,加入200ml MilliQ級純水或雙蒸水,,室溫?fù)u動(dòng)10分鐘。

5. 顯色:加入100ml銀溶液(1X)或顯色液,,室溫?fù)u動(dòng)10分鐘,。

6. 洗滌:棄去顯色液,加入200ml MilliQ級純水或雙蒸水,,室溫?fù)u動(dòng)1-1.5分鐘,。

7. 顯影:根據(jù)顯色結(jié)果,使用顯影液進(jìn)行顯影,,直至看到目的蛋白帶



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