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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2024-06-18 10:09:25瀏覽次數(shù):533次
聯(lián)系我時(shí),,請告知來自 化工儀器網(wǎng)組織石蠟包埋和切片:
1,、切取組織,浸泡在4%用pH7.4 BS配成的甲醛固定劑中,,室溫24小時(shí),。
附:4%甲醛固定劑(5ml):4.5ml 1×PBS(pH7.4)+0.5ml甲醛
2、倒掉甲醛固定劑,,加pH7.4 BS,每隔8小時(shí)更換一次,,4℃保存,換液共3天,。
3,、打開烘箱,調(diào)溫至62℃,,融石蠟,。
4、酒精梯度脫水(30%,、50%,、70%、80%,、90%,、95%,、100%×2),,隔30分鐘更換一次。
5,、50%酒精+50%二甲苯30分鐘(過渡步驟),。
6、100%二甲苯,,時(shí)刻觀察組織塊至透明,。
7,、放入烘箱中已經(jīng)預(yù)融的50%石蠟+50%二甲苯中,30分鐘,。
8,、100%石蠟兩遍,每次2小時(shí),。(若石蠟浸潤不夠,,仍有二甲苯,則包埋后的石蠟塊較脆,,易分層,、斷裂。)
9,、100%石蠟紙盒內(nèi)凝固(先用蠟打底,,再放入組織塊,澆上蠟包埋,,放入4℃冰箱或水中冷凝,,標(biāo)明組織塊放入方向),4℃存放備用,。
10,、修塊。
11,、融化石蠟?zāi)ㄓ趬K底,,貼在木塊上,壓實(shí),。
12,、切片(5-10μm),將切片平展于平板上,光面朝上,。
13,、將光面朝下,將石蠟薄切片放于水面上(水溫40℃),,使其伸展,。(時(shí)間勿太長)。
14,、將石蠟薄片貼在預(yù)先處理好的玻片上,。
15、40℃烘烤過夜,。
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