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腫瘤動物模型

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更新時間:2024-01-12 10:43:20瀏覽次數(shù):556次

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腫瘤動物模型:常用見的動物實驗是腫瘤動物模型的構建,,一般包括小鼠移植瘤模型和轉基因動物模型,。轉基因動物模型則是引入致癌基因或敲除抑癌基因建立自發(fā)腫瘤或誘導生成腫瘤的轉基因模型小鼠,再在模型小鼠的基礎上進行相應的實驗,。

腫瘤動物模型第一類是皮下移植瘤


顧名思義,,這種模型的建立是將腫瘤細胞或腫瘤組織直接種植在小鼠的皮下,。種植的點也有講究,,一般選擇血運淋巴回流豐富的腹股溝和腋窩,。可根據(jù)實驗設計選擇移植點,,統(tǒng)一移植點的位置,,除了遵守實驗統(tǒng)一的條件外,待腫瘤成熟后收集腫瘤時留下照片證據(jù)也顯得美觀,。


裸鼠(Balb/c 鼠,, 無毛發(fā),, T 淋巴細胞缺陷)是比較常見和常用的實驗用鼠,尤其是在皮下移植瘤腫瘤模型的建立中起到重要作用,。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短,、成瘤率高、易于操作,、成本低的優(yōu)點,。當然,這種腫瘤模型也有缺陷,,即不能很準確的模擬正常人體腫瘤發(fā)生發(fā)展的過程,。


腫瘤動物模型腫瘤細胞移植時的簡要步驟


首先準備好要移植的腫瘤細胞(細胞量根據(jù)不同腫瘤略有不同,,我們所用的前列腺癌細胞系每個移植點一般選擇 1x106 左右,;腫瘤細胞可與基質膠 1:1 混勻后用 1 ml 注射器吸取,基質膠能夠給腫瘤細胞提供營養(yǎng)環(huán)境,,有助于腫瘤細胞生長),。


戴無菌手套后,將小鼠用左手大拇指和食指捏住頸部皮膚,,然后將鼠尾用左手無名指和小指固定于左手大魚際,。將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次。右手持吸有腫瘤細胞和基質膠混合液的注射器,,在腹股溝或腋窩的位置,,45 度斜角進針,注意不要突破腹膜,,將針頭保持于皮下位置,。


然后近水平位置將針頭幾乎wan全插入皮下,將混有基質膠的腫瘤細胞注射入皮下(腫瘤細胞量約 1x106),,快速退針,,左手食指輕壓針孔約 1 min 后將小鼠放回飼養(yǎng)籠中,注意將小鼠側放于墊料上,,放置其不適嘔吐時嘔吐物誤入呼吸道引起窒息,。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。


如果是利用腫瘤組織(人體腫瘤標本或小鼠移植瘤傳代)建立裸鼠皮下移植瘤模型,,則需要首先將腫瘤組織用無菌 PBS(或 1640 培養(yǎng)基)洗滌 3 次,,然后在無菌平皿上切成或用無菌剪刀剪成<1 mm3 體積的小塊(種植前可裹基質膠)備用。


將小鼠用水he氯醛麻醉后平臥于解剖板上,,四肢用膠帶固定,,將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次,然后用眼科剪剪開約 0.5 cm 小口,,小鑷子將皮下筋膜與皮膚分開,,然后將腫瘤組織放入貼近腹股溝或腋窩的深部,每個位置放置 2~3 塊腫瘤組織,注意不同組間統(tǒng)一放置腫瘤組織塊數(shù)以保持一致,。


然后縫合皮膚,,消毒后將小鼠側臥位放置于飼養(yǎng)籠的墊料上。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒,。


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