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糖尿病視網(wǎng)膜病變視模型

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所  在  地上海市

更新時間:2024-06-18 10:12:55瀏覽次數(shù):528次

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糖尿病視網(wǎng)膜病變視模型:將模型小鼠與對照組健康小鼠頸椎脫臼處死,,迅速摘取眼球,,眼球置于PBS中小心,、快速地將視網(wǎng)膜分離出來,,以視乳頭為中心做個放射狀切開,,將視網(wǎng)膜平鋪鋪片,,進行ADP酶血管染色,。

糖尿病視網(wǎng)膜病變模型來源

鏈脲佐菌素(STZ)導致糖尿病,,并誘導視網(wǎng)膜病變


模式動物品系:SPF 級SD大鼠,雄性,,8 周


實驗分組:正常對照組,、模型組,、陽性藥組、受試藥組三個劑量組


實驗周期:8~10 weeks


糖尿病視網(wǎng)膜病變模型建模方法

適應性飼養(yǎng)1周后進行建模,。糖尿病組建模前禁食16h,,稱重空腹體重,尾靜脈取血測定血糖濃度,,一次性腹腔注射鏈脲佐菌素STZ(65mg/kg),,72h、96h,、120h后應用穩(wěn)步血糖測定儀檢測隨機血糖,,測定體重,觀察一般情況如體型及毛發(fā)顏色變化,。每組取尾靜脈血測量血糖,,連續(xù)3次血糖≥16.7mmol/L,并出現(xiàn)典型的“三多一少"癥狀者,,即可確定為糖尿病小鼠,。


健康對照組將STZ改為等體積生理鹽水,其它步驟相同,。


取材:造模后6周處死,,取左眼及右眼視網(wǎng)膜。


制備視網(wǎng)膜消化鋪片:大鼠麻醉后斷頭處死,,取眼球,,4%多聚甲醛固定24~48h,自睫狀體后部近鋸齒緣剪開鞏膜,,去掉眼晶狀體和玻璃體,,將眼后段平均分成3份, 在水中輕輕漂取視網(wǎng)膜,;清水漂洗2~3h。將視網(wǎng)膜放人用3%胰蛋白mei消化溶液中,,在37°C恒溫箱中孵育2~3h,,將視網(wǎng)膜輕輕移人蒸餾水中,輕輕吹打,,使殘余的視網(wǎng)膜神經成分及內界膜全脫去,,剩下一層透明的視網(wǎng)膜血管網(wǎng),移到載坡片上盡量鋪平,,自然干燥,。



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