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所 在 地上海市
更新時間:2024-06-18 10:12:55瀏覽次數(shù):633次
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鏈脲佐菌素(STZ)導(dǎo)致糖尿病,,并誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變
模式動物品系:SPF 級SD大鼠,,雄性,8 周
實驗分組:正常對照組,、模型組,、陽性藥組、受試藥組三個劑量組
實驗周期:8~10 weeks
糖尿病視網(wǎng)膜病變模型建模方法
適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后進(jìn)行建模,。糖尿病組建模前禁食16h,,稱重空腹體重,尾靜脈取血測定血糖濃度,,一次性腹腔注射鏈脲佐菌素STZ(65mg/kg),,72h、96h,、120h后應(yīng)用穩(wěn)步血糖測定儀檢測隨機(jī)血糖,,測定體重,觀察一般情況如體型及毛發(fā)顏色變化,。每組取尾靜脈血測量血糖,,連續(xù)3次血糖≥16.7mmol/L,并出現(xiàn)典型的“三多一少"癥狀者,,即可確定為糖尿病小鼠,。
健康對照組將STZ改為等體積生理鹽水,其它步驟相同,。
取材:造模后6周處死,,取左眼及右眼視網(wǎng)膜。
制備視網(wǎng)膜消化鋪片:大鼠麻醉后斷頭處死,,取眼球,,4%多聚甲醛固定24~48h,自睫狀體后部近鋸齒緣剪開鞏膜,,去掉眼晶狀體和玻璃體,,將眼后段平均分成3份, 在水中輕輕漂取視網(wǎng)膜,;清水漂洗2~3h,。將視網(wǎng)膜放人用3%胰蛋白mei消化溶液中,在37°C恒溫箱中孵育2~3h,,將視網(wǎng)膜輕輕移人蒸餾水中,,輕輕吹打,使殘余的視網(wǎng)膜神經(jīng)成分及內(nèi)界膜全脫去,,剩下一層透明的視網(wǎng)膜血管網(wǎng),,移到載坡片上盡量鋪平,自然干燥,。
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