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所 在 地上海市
更新時間:2024-01-10 10:27:31瀏覽次數(shù):445次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)肥胖模型造模舉例:
①肥胖模型組采用高脂飼料喂養(yǎng),,高脂飼料:普通飼料60%,豬油12%,,蔗糖5%,,花生5%,雞蛋10%,,麻油1%,,食鹽2%,魚肝you適量,;對照組普通飼料喂養(yǎng),,共8周。
所有大鼠在造模期間自由攝食和飲水,,保持室內(nèi)溫度20±1℃,,濕度在40%-60%之間,,記錄兩組大鼠體重、體長,、Lee’s指數(shù),,并檢測各組血脂水平。
②實驗動物:40只SD雄性大鼠,,動物等級SPF,,體重(75±5)g。在有空調(diào)的動物室分籠飼養(yǎng),,溫度19~26℃,,相對濕度40%~70%,每籠5只,,照明時間12h,。
給予高脂飼料適應飼養(yǎng)2周后,將體重增加排在后1/3的大鼠作為肥胖抵抗大鼠剔除,。其余大鼠隨機分成2組,,即正常對照組給予普通飼料飼喂,高脂飲食組給予高脂飼料喂養(yǎng),。
觀察指標:
①一般情況觀察:每天觀察動物的精神狀態(tài),、皮毛光澤、活動,、食欲、大便等情況,,并詳細記錄,。
②體重:每周稱重1次。
③體長及Lee's指數(shù):實驗結(jié)束時,,麻醉后測量體長(大鼠從鼻至肛men的長度),,并根據(jù)公式[Lee's指數(shù)=體重(g)1/3×103/體長(cm)]計算Lee's指數(shù)。
④脂肪濕重及脂肪指數(shù):實驗結(jié)束時,,取體脂(網(wǎng)膜,、睪周及腎周脂肪)并稱重,計算脂肪指數(shù),。脂肪指數(shù)(%)=(腎周脂肪+睪周脂肪+網(wǎng)膜脂肪)/體重×100,。
⑤血脂測定:實驗結(jié)束時,大鼠經(jīng)24h禁食麻醉自頸動脈采血,,離心并分離出血清,,用全自動生hua分析儀檢測血清總膽gu醇(TC)、三酰甘油(TG),、高密度脂蛋白膽gu醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽gu醇(LDL-C)水平,。
⑥肝脂測定:取肝臟左葉重約1g,,在1∶9勻漿介質(zhì)(甲醇∶yi醚=1∶1)中,以電動勻漿機4℃下制成10%勻漿,,4℃下4000r/min離心10min,,提取上清液,采用全自動生hua分析儀檢測TC,、TG,。
這種模型發(fā)育的時間更接近于大多數(shù)人群體重增加的過程。而這種模型也受很多因素的影響,,如品系,、性別、周齡,、飲食等,。
高脂飼料配方并不固定,很多研究均在 探討營養(yǎng)性肥胖造模配方,,通常采用的飼喂方法有自由采食及灌胃等,。該類造模方法成本較低,成功率高,,且具有較強的重復性
藥物誘導肥胖模型
1. 谷an酸鈉(MSG)誘導
新生小鼠或大鼠皮下注射MSG可誘導其產(chǎn)生肥胖,。
高劑量谷an酸鈉可以損傷下丘腦弓狀核及其鄰近區(qū)域,導致攝食及能量代謝紊亂,,引起肥胖,。谷an酸鈉誘導的肥胖模型會出現(xiàn)高血糖、高脂血癥和胰島素抵抗,,但這種方法會抑制肝脂質(zhì)沉積,,所以除了肥胖外它還可以用作非酒精性脂肪肝的動物模型。
實驗方法:
新生ICR乳鼠自出生當天開始每日注射谷an酸鈉(MSG)連續(xù)4d,,每籠1只母鼠喂養(yǎng)乳鼠3~6只,,飼以基礎飼料,任意飲氯化水,,置于標準動物室,。在6周齡時連續(xù)4d測定每籠攝入和散落的飼料量,計算平均飼料和水攝入量·鼠,。實驗期間定時測定尿糖,、血糖、胰島素,、總膽gu醇(TC),,TG,低密度脂蛋白-膽gu醇(LDL-C),、高密度脂蛋白-膽gu醇(HDL-C),、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)以及做糖耐量試驗、胰島素耐受試驗?并測量小鼠從口至肛men的長度,、稱重,。用方程式:體重(g)/體長2(cm2)計算身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)。
實驗末所有小鼠取肝,、胰,、腎、眼,、坐骨神經(jīng),、內(nèi)臟白色脂肪組織、肩胛間棕色脂肪組織,、主動脈和大腦稱重,,然后作病理檢查。
2. 金硫葡萄糖(GTG)致肥胖模型
給成年小鼠腹腔注射GTG可誘導其產(chǎn)生肥胖,,金硫葡萄糖是損傷下丘腦腹內(nèi)側(cè)核,,增加食欲引起肥胖。其作用機制尚不明確且金硫葡萄糖價格高昂,、造模時間長且腹腔注射動物死亡率高限制了它的應用,。
這種動物的血糖升高,血清胰島素水平也升高,;從其胰島分離的細胞的胰島素合成顯著增加cAMP含量和葡萄糖氧化亦顯著增加,。胰島素敏感性受抑制,胰島肥大伴脫顆粒,,提示該肥胖模型與B細胞反應改變有關(guān),。
研究發(fā)現(xiàn),在注射GTG后2周,,動物心臟對葡萄糖致丙酮酸脫氫酶升高的反應減弱,在WAT和BAT升高2~3倍,,而這些反應在給藥后5~10周消失,。肝中糖元儲存增加,磷酸化酶的激活及磷酸葡萄糖均顯著增加,,這可能與胰島素抵抗及葡萄糖耐量異常有關(guān),。
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