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肺栓塞動(dòng)物模型

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肺栓塞動(dòng)物模型:肺栓塞(pulmonary thromboembolism,,PTE)是由于內(nèi)源性或外源性栓子堵塞肺動(dòng)脈主干或分支引起肺循環(huán)障礙的臨床和病理生理綜合征,由于肺栓塞未受到足夠重視,,并且發(fā)病及臨床表現(xiàn)的隱匿性和復(fù)雜性,,以致漏診、誤診率高,,在死前被正確診斷的病例僅為39%~50%,。同時(shí),在過(guò)去的幾年里,,我國(guó)PTE的患病率呈三倍以上增長(zhǎng)

肺栓塞動(dòng)物模型動(dòng)物的選擇


研究肺栓塞的病理生理學(xué)及影像學(xué),,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要是狗、兔等,;肺栓塞的治療研究,,動(dòng)物主要是大鼠、小鼠,。


肺栓塞動(dòng)物模型造模方法


一,、家兔肺栓塞模型


家兔模型是目前最為成熟和普遍使用的,而且家兔的纖容系統(tǒng)比狗和豬更接近于人體的纖容系統(tǒng),,所以家兔模型也是目前最為理想的肺栓塞模型,。


1


體外血栓形成法


造模方法:造模前從耳緣靜脈抽血1 mL,注入無(wú)菌瓶?jī)?nèi)靜置一段時(shí)間,,使其凝血制成自體血凝塊,,再經(jīng)股靜脈注入制好的血凝塊,輔以NS使血凝塊隨血液循環(huán)運(yùn)行至肺動(dòng)脈并將其堵塞,,建立急性肺栓塞模型,。


Tips:制作急性肺血栓栓塞模型的栓子很多,包括:血凝塊,、明膠海綿,、玻璃體球狀物、α2凝血mei,、膠原蛋白等,。一般實(shí)驗(yàn)室常用血凝塊。由于自體血栓的形成和臨床肺栓塞癥血栓的形成具有一定的相似性,,故能更真實(shí)地反映疾病的病理生理改變,。


二、犬肺栓塞模型


1


自體血凝塊法


犬的急性肺栓塞模型多用體外自體血凝塊法,。


造模方法:股動(dòng)脈抽血80~100mL,,注入到含凝血mei的玻璃器皿中,靜止使其凝固,,制成大小約10mm×10mm×5mm的xue塊,,經(jīng)右頸靜脈注入栓子,要維持肺動(dòng)脈壓在50~60mmHg,,一旦低于50mmHg,,需再次注入栓子,此過(guò)程持續(xù)30 min,,之后穩(wěn)定1h,。


三、鼠肺栓塞模型


鼠模型的制備有的采用血凝塊,,有的用藥物誘導(dǎo),,自體血凝塊的制作與犬模型中的血凝塊的制作方法相似。


栓子制作:無(wú)菌條件下從頸動(dòng)脈插管取血0.5ml,,迅速推入細(xì)聚乙烯導(dǎo)管,,室溫靜置25~30 min凝固,推入生理鹽水,,制成直徑約0.6~0.8 mm自體血栓,。無(wú)菌手術(shù)dao切成長(zhǎng)3~4 mm,滅菌生理鹽水反復(fù)沖洗,,計(jì)數(shù)約50個(gè)備用,。


造模方法:腹腔注射20%烏拉坦6 ml/kg麻醉,必要時(shí)追加0.5 ml/h,。沿頸前正中線做長(zhǎng)約2cm 切口,,鈍性分離右頸外靜脈和左頸動(dòng)脈,,插管分別接YP100型壓力傳感器,量程分別為(-10~10 kPa)和(-10~40 kPa),,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)肺動(dòng)脈壓和體動(dòng)脈壓的變化,。右頸外靜脈經(jīng)導(dǎo)管快速、反復(fù)注入已制備血栓20~30個(gè),,注栓速度0.5 ml/s,,使肺動(dòng)脈收縮壓(sPAP)維持在40~60 mmHg之間約60 min,生理鹽水沖洗以防栓子滯留于導(dǎo)管或頸靜脈內(nèi),??p合切口,電腦記錄肺動(dòng)脈壓和體動(dòng)脈壓動(dòng)態(tài)變化,。


造模結(jié)果:大鼠自體血栓肺栓塞模型制備的成功率約85%,。注入自體血栓20~30 min后,大鼠肺動(dòng)脈壓明顯升高,。早期肺動(dòng)脈壓升高后很快回落,,后隨血栓的注入逐漸持續(xù)升高,能維持2~4 h,。同時(shí)大鼠呼吸加快加深,,口唇發(fā)紺,兩肺出現(xiàn)彌漫性干濕啰音等肺栓塞體征,。肺灌注掃描ECT顯像,,見(jiàn)兩肺明顯放射性缺損和稀疏。大體組織見(jiàn)肺膨脹不全,,胸膜下和切面上見(jiàn)較多的散在出血灶,。肺組織光鏡觀察見(jiàn)肺動(dòng)脈內(nèi)有注入的血栓團(tuán)塊,以淡藍(lán)色纖維素包繞大量紅細(xì)胞,,可區(qū)別于肺淤血,。同時(shí)見(jiàn)肺血管壁肌層組織水腫,大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),。


優(yōu)點(diǎn):采用改良右心導(dǎo)管法,,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)肺動(dòng)脈壓變化。其較通常的股靜脈注栓法具有路徑短,、栓子穩(wěn)定,、可控性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。



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