帕金森病動(dòng)物模型

自發(fā)現(xiàn)以來(lái),，6-OHDA一直在帕金森病的臨床前研究中扮演著重要角色。由Ungerstedt和Arbuthnott在1970年共同創(chuàng)立的單側(cè)注射旋轉(zhuǎn)模型成為了在模式動(dòng)物上被最為廣泛使用的帕金森模型之一,。

6-羥多巴胺（6-hydroxydopamine,，6-OHDA）是多巴胺的羥基化衍生物，因其化學(xué)結(jié)構(gòu)與DA類似,，因此能夠同DA競(jìng)爭(zhēng)攝取位點(diǎn),，進(jìn)而被攝入胞內(nèi)。進(jìn)入胞內(nèi)后,，6-OHDA能夠被氧化分解,，產(chǎn)生活性氧，通過(guò)MAO（單胺氧化酶）進(jìn)一步產(chǎn)生氧自由基,，或直接引起線粒體功能障礙,，導(dǎo)致DA能神經(jīng)元死亡。

因其造成動(dòng)物的生物化學(xué)和神經(jīng)化學(xué)損傷類似于PD,，故常被用于誘導(dǎo)動(dòng)物PD模型,。

由于6-OHDA不能穿透血腦屏障，因此為了達(dá)到中樞神經(jīng)系統(tǒng)毀傷的效果,，在使用6-OHDA進(jìn)行帕金森造模時(shí),，需要直接注射入動(dòng)物腦內(nèi)，才能損傷中樞神經(jīng)元,。

通過(guò)使用腦li體定wei注射技術(shù)將6-OHDA注射到前腦內(nèi)側(cè)束（其向前腦傳遞多巴胺能和5-羥色胺能投射）或紋狀體靶向黑質(zhì)紋狀體多巴胺能途徑來(lái)獲得帕金森模型大鼠,。【具體的注射位點(diǎn)可以是黑質(zhì)致密部（substantia nigra pars compacta, SNpc）,、紋狀體（striatum）或者位于二者之間的前腦內(nèi)側(cè)束（MFB）,。】

可以進(jìn)行單側(cè)造模與雙側(cè)造模,，其中單側(cè)造?？梢蕴岣邉?dòng)物耐受力,，并可以將正常側(cè)作為內(nèi)部控制組與造模側(cè)進(jìn)行對(duì)照研究，以便于更好地區(qū)分正常與異常運(yùn)動(dòng)區(qū)并評(píng)估損傷引起的運(yùn)動(dòng)缺陷,。

帕金森病動(dòng)物模型造模方法：

①SD大鼠適應(yīng)一周后,，腹腔麻醉，將麻醉后大鼠固定于腦li體定向儀上,。

②剪開(kāi)頭皮后用棉簽輕輕擦拭顱骨表面,，將前囟（bregma）和后囟（lambda）點(diǎn)暴露出來(lái)。

③調(diào)節(jié)立li定wei儀,，將前囟和后囟點(diǎn)的高度調(diào)節(jié)到一致,。以前囟（Bregma）點(diǎn)為原點(diǎn)，找到注射位點(diǎn)所在的坐標(biāo)

④用顱骨zuan沿注射坐標(biāo)位點(diǎn)鉆孔,，以保證微量注射器進(jìn)針時(shí)不碰到孔壁,。使用微量注射器吸取6-OHDA（注意避光），緩慢插入注射位點(diǎn),，以0.5ul/min的速度將6-OHDA注射到目標(biāo)腦區(qū),，注射劑量為4μl。

帕金森病動(dòng)物模型驗(yàn)證：

由于動(dòng)物行為特異性差異,，判斷大鼠帕金森病模型是否成功,，通常以動(dòng)物出現(xiàn)旋轉(zhuǎn)行為的次數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)，一般超過(guò)7轉(zhuǎn)/min即為成功的帕金森病模型,，否則為不成功模型,。

這類模型優(yōu)點(diǎn)是注射靶位選取靈活，注射劑量可調(diào),，動(dòng)物行為變化穩(wěn)定可靠,，檢測(cè)量化性好，多用于PD的臨床前藥物研究和藥理療效判定,、神經(jīng)保護(hù),、細(xì)胞移植和基因治療等方面的研究。

缺點(diǎn)是①神經(jīng)元的毀損出現(xiàn)的較早,，這與臨床PD病人的中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的漸進(jìn)性死亡不同,；②近距離的毀損很難把握毀損的程度，這使得采用這種方法獲取部分損毀的模型的成功率很低,；③小鼠在異常不自主運(yùn)動(dòng)嚴(yán)重程度方面表現(xiàn)出較大的變異性，這會(huì)加大實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的不穩(wěn)定性,。