原代神經干細胞

1. 犧牲胎齡14-16天的SD大鼠，刮除腹部手術區(qū)域的毛發(fā),，75%乙醇全身浸泡消毒,。

2. 解剖孕鼠，取出子宮并沖洗,。

3. 取出胚胎,，置于含有冰冷的HBSS液平皿中。

4. 手shu顯wei鏡下剝離出大腦半球,，小心地剝去腦膜和血管,。

5. 剝去腦膜和血管的大腦皮質，用冰冷的HBSS液清洗三次,。

6. 將大腦皮質剪成1mm³的小塊,，用1ml槍頭輕輕吹打后，使之成為細胞懸液,，并通過70um的篩網過濾,。

7. 將收集到的細胞懸液離心后，用神經干細胞基礎培養(yǎng)液重懸,，然后離心,，棄掉上清液。

8. 經計數(shù)和活力觀察,，將細胞密度調至1×10⁶/ml,，以1.5×10⁵/ml的細胞密度種入T25培養(yǎng)瓶中，同時加入FGF-2和EGF于5%CO₂,、37℃環(huán)境中培養(yǎng)，直到神經干細胞分裂,、增殖形成較大的神經細胞球后再作傳代處理,。

9. 細胞傳代，將神經細胞球懸液移至離心管,，經低速離心后,，吸棄上清液，加入神經干細胞完quan培養(yǎng)液,，用200ul槍頭吹打,，使之成為單個細胞懸液，定量加入神經干細胞完quan培養(yǎng)液后,，進行細胞計數(shù)和活力觀察,。

10. 傳代后的細胞既可用來誘導分化，也可以繼續(xù)種瓶培養(yǎng),，還可以冷凍保存以備后用,。

11. 神經干細胞的分化和鑒定。

原代神經干細胞

  伊萊博生物科技（上海）有限公司，公司總部位于上海長江軟件園,。2022年1月與上海交通大學藥學院成立聯(lián)合研究中心,，主要以生命科學研究為基礎，專注于研究成果轉化及技術服務創(chuàng)新,，建立了包含腫瘤生物學,、病理學、免疫學,、細胞生物學,、生物化學與分子生物學以及動物實驗等學科的研究服務體系，為醫(yī)學領域的發(fā)展做出了重要貢獻,。

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