1.用二甲苯浸洗2次，每次5min;

2.用梯度7醇(100.95.90.80、70%)各浸洗1次,，每次3min:注:上面兩步是針對石蠟切片樣木的外理

3.用Proteinase K作液外理組織15 30 min 在21-370(溫度、時間,、濃度均需摸索)或者加細胞通透液8min

4.PBS漂洗2次;

5.制備TUNEL反應(yīng)混合液,，處理組用50ulTdT+450ul 熒光素標記的dUTP液混勻;而陰性對照組僅加50ul 熒光素標記的dUTP液，陽性對照組先加入100ul DNase 1,，反應(yīng)在15~25℃x10min,，后面步驟同處理組。

6.玻片干后,，加50uI TUNEL反應(yīng)混合液(陰性對照組僅加50u熒光素標記的dUTP液)于標本上,，加蓋玻片或封口膜在暗濕盒中反應(yīng)37℃x1h。

7.PBS漂洗3次;

8. 可以加1滴PBS在熒光顯微鏡下計數(shù)凋亡細胞(激發(fā)光波長為450~500nm,，檢測波長為515~565nm);

9.玻片干后加50ul converter-POD干標本上,，加蓋玻片或封口膜在暗濕盒中反應(yīng)37°cx30min.

10.PBS漂洗3次，

11.在組織處加50~100uIDAB底物,，反應(yīng)15~25℃℃x10min;

12.PBS漂洗3次;

13.拍照后再用蘇木素或電其綠復(fù)染,，幾秒后立即用自來水沖洗。梯度灑精脫水,，二電苯透明,，中性樹膠封片。

14.加一滴PBS或甘油在視野下,，用光學顯微錯觀察凋廣細胞(共計200~500個細胞)并拍照,，可結(jié)合調(diào)廣細胞形太特征來綜合判斷(未染色細胞變小，胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,，晚期出現(xiàn)凋亡小體,，貼壁細胞出現(xiàn)鄒縮、變圓,、脫落;而染色細胞呈現(xiàn)染色質(zhì)濃縮,、邊緣化，核膜裂解,，染色質(zhì)分割成塊狀/凋亡小體,。

我們擁有專業(yè)的實驗室,、精良的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團隊包括研究員（博士后）2人,，助理研究員（博士）4人,，核心研究員（碩士）15人，主要致力于基因組學,、轉(zhuǎn)錄組學,、蛋白質(zhì)組學、代謝組學,、生物化學,、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣,。通過高度細分,、較好的的服務(wù)平臺，為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù),。目前,，及，涉及臨床醫(yī)學,、腫瘤生物學,、免疫學,、細胞生物學,、分子生物學等生命科學、醫(yī)學等諸多領(lǐng)域,。