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伊萊博生物科技(上海)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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堿性磷酸酶染色檢測(cè)技術(shù)

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更新時(shí)間:2025-06-04 15:20:16瀏覽次數(shù):677次

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堿性磷酸酶染色檢測(cè)技術(shù)原理:
在一定條件下,,使細(xì)胞中的酶作用于酶的底物,,使其產(chǎn)物在原地進(jìn)行 捕捉、沉淀轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物,,細(xì)胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0-9.6)環(huán)境下使作用液中的底物(a-磷酸萘酚鈉)水解,,產(chǎn)生出a萘酚,然后再與 偶氨鹽偶聯(lián),生成不溶性的耐曬染料

實(shí)驗(yàn)操作流程:

1,、取材,、 固定、包埋,、切片;

2,、取已粘好烘 干的切片兩塊,放入二甲苯(一)→二甲苯(二)(各3-4分鐘)的染缸中進(jìn)行脫蠟,再經(jīng)100%乙醇(一)

→100%<醇(二)→95%乙醇→90%乙醇 →70%醇→30%乙醇→水,。每級(jí)各一分鐘,,在移切片時(shí),用鑷子夾住切片震蕩

并提起,,放下反復(fù)幾次,在移入下一染缸邊緣前稍停留,,讓溶液滴凈后,,再入下 一染缸,以免把上一染缸溶液過(guò)多帶入下

一染缸,,而影響切片質(zhì)量;

3,、將其中一塊切片以蠟筆作一標(biāo)記(用作對(duì)照組切片),放入沸水中煮沸5分鐘;

4,、將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘,,作用液要事先預(yù)熱到37℃,水浴中進(jìn)行;

5,、取出切片在蒸餾水中洗滌;

6,、放入硝.酸.鈷溶液2-3分鐘;

7、蒸餾水沖洗干凈,,否則切片易被污染,,影響定位;

8、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;

9,、蒸餾水沖洗干凈;

10,、經(jīng)各級(jí)酒精脫水。即30%乙醇→70%乙醇→90%乙醇→950%乙醇→100%乙醇(二)→100%乙醇(一),,各級(jí)一分鐘,。

我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、精良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員,。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,,主要致力于基因組學(xué),、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué),、代謝組學(xué),、生物化學(xué)、病理檢測(cè),、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣,。通過(guò)高度細(xì)分、較好的的服務(wù)平臺(tái),,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù),。目前,,及,涉及臨床醫(yī)學(xué),、腫瘤生物學(xué),、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、分子生物學(xué)等生命科學(xué),、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。



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