研究背景

棕櫚?；≒almitoylation）是一種關鍵的翻譯后修飾，通過將棕櫚酸共價連接到蛋白質的半胱an酸殘基上,，調節(jié)蛋白質的穩(wěn)定性,、

亞細胞定位和功能。這一修飾由棕櫚?；D移酶（PATs,，如ZDHHC家族酶）催化，是可逆的,，可通過?；鞍琢蝓ッ福ˋPT1和APT2）

去除,。棕櫚酰化在細胞信號傳導,、代謝調控和細胞間相互作用中發(fā)揮重要作用,，尤其在癌癥中，通過調節(jié)癌蛋白的活性和穩(wěn)定性,，

促進腫瘤發(fā)生,、發(fā)展和耐藥性。

鐵死亡（Ferroptosis）是一種鐵依賴性的程序性細胞死亡形式,，由脂質過氧化物的積累引起,。其關鍵調節(jié)因子包括SLC7A11（也稱xCT），

屬于系統(tǒng)XC?轉運蛋白,。SLC7A11通過促進細胞內外L-谷an酸的反向轉運,，支持細胞內gu胱甘肽的合成和抗氧化防御，從而抵御氧化應激,。

SLC7A11的失調與多種人類惡性腫瘤密切相關,，且其過表達可削弱化療、放療及免疫治療的效果,。

    本研究聚焦于膠質母細胞瘤中SLC7A11的棕櫚?；揎椉捌湓阼F死亡抵抗中的作用,。研究首先確認SLC7A11在膠質瘤細胞中的S-棕櫚?；瘜?/p>

其蛋白穩(wěn)定性至關重要，隨后鑒定出ZDHHC8是其關鍵棕櫚?；D移酶,，通過催化C327位點的棕櫚酰化減少SLC7A11的泛素化和降解,。進一步

揭示AMPKα1通過磷酸化ZDHHC8的S299位點增強其與SLC7A11的結合,，促進棕櫚酰化,，從而增強鐵死亡抵抗,，展現(xiàn)了其作為潛在治療靶點的價值。

研究結果

1. SLC7A11的棕櫚?；龠M其蛋白穩(wěn)定性

首先,，我們通過Alk-C16代謝標記驗證了SLC7A11發(fā)生S-棕櫚酰化修飾,。然后,，使用棕櫚?；种苿?-BP處理后,，SLC7A11蛋白水平降低,，

而使用棕櫚?；敢种苿㏄almostatin B處理則增加了SLC7A11的穩(wěn)定性。此外,，SLC7A11的棕櫚?；种茣铀倨浣到猓疫@種降解主要通過

溶酶體途徑完成,。表明了SLC7A11的S-棕櫚?；瘜ζ涞鞍追€(wěn)定性至關重要，且通過溶酶體途徑調節(jié)其降解,。

2. ZDHHC8減少SLC7A11的多泛素化和降解

通過siRNA篩選鑒定出ZDHHC8是SLC7A11的關鍵棕櫚?；D移酶（PAT），并驗證了ZDHHC8與SLC7A11的直接相互作用,。實驗發(fā)現(xiàn),，

ZDHHC8能夠催化SLC7A11的棕櫚酰化,，減少其多泛素化水平,，從而抑制其溶酶體介導的降解。揭示了ZDHHC8通過催化SLC7A11的棕

櫚?；瘻p少其多泛素化和降解,，維持SLC7A11的蛋白穩(wěn)定性。

3. ZDHHC8催化SLC7A11在C327位點的棕櫚?；?/strong>

通過突變SLC7A11的所有半胱an酸殘基,，我們發(fā)現(xiàn)ZDHHC8在C327位點催化SLC7A11的棕櫚酰化,。該位點的突變（C327S）顯著降低了

ZDHHC8介導的棕櫚?；铀倭薙LC7A11的降解,。表明了ZDHHC8通過在C327位點催化SLC7A11的棕櫚?；S持其穩(wěn)定性。

4. ZDHHC8/SLC7A11軸對膠質瘤的致瘤性至關重要

通過體外細胞實驗和體內動物模型驗證了ZDHHC8/SLC7A11軸在膠質瘤中的作用,。ZDHHC8敲低顯著抑制膠質瘤細胞的增殖,，

增加脂質ROS水平,，且這種效應可通過鐵死亡抑制劑逆轉。在動物模型中,，ZDHHC8敲低抑制了腫瘤生長并延長了小鼠的生存期,。

表明ZDHHC8/SLC7A11軸通過調節(jié)鐵死亡在膠質瘤的致瘤性中發(fā)揮重要作用。

5. AMPKα1直接磷酸化ZDHHC8的S299位點

首先,，通過序列比對分析預測AMPKα1可能磷酸化ZDHHC8的S299位點,，并驗證了AMPKα1與ZDHHC8的直接相互作用。體外激酶

實驗進一步證實AMPKα1能夠磷酸化ZDHHC8的S299位點,，增強其與SLC7A11的結合,，促進SLC7A11的棕櫚酰化,。說明AMPKα1通過

磷酸化ZDHHC8的S299位點調節(jié)SLC7A11的棕櫚?；M而影響鐵死亡的抵抗,。

6. 抑制ZDHHC8磷酸化干擾其與SLC7A11的結合

接著,，通過抑制AMPKα1活性或敲低AMPKα1，研究者發(fā)現(xiàn)SLC7A11的棕櫚?；斤@著降低,，脂質過氧化和脂質ROS水平增加,。

此外,，非磷酸化突變體ZDHHC8 S299A顯著減弱了其與SLC7A11的結合。表明ZDHHC8的磷酸化對其與SLC7A11的結合至關重要,，

影響鐵死亡的調控,。

7. ZDHHC8、SLC7A11和AMPKα1的臨床相關性

為了研究ZDHHC8在膠質瘤細胞系和臨床樣本中的表達水平,，并分析其與SLC7A11和AMPKα1的相關性,。我們收集臨床樣本，

ZDHHC8在膠質瘤細胞系中高表達,，且其表達水平與SLC7A11和AMPKα1呈正相關,。高表達ZDHHC8/SLC7A11,、

ZDHHC8/AMPKα1或SLC7A11/AMPKα1的患者預后更差。結論：ZDHHC8,、SLC7A11和AMPKα1在膠質瘤中高表達且相互關聯(lián),，

與患者不良預后相關，可作為潛在的治療靶點,。

研究結論

1. ZDHHC8介導的SLC7A11棕櫚?；瘜ζ浞€(wěn)定性至關重要：研究發(fā)現(xiàn)，ZDHHC8通過在C327位點催化SLC7A11的棕櫚?；?，減少其

泛素化和溶酶體降解，從而維持SLC7A11的蛋白穩(wěn)定性,。

2. AMPKα1通過磷酸化ZDHHC8增強鐵死亡抵抗：AMPKα1能夠磷酸化ZDHHC8的S299位點,，增強其與SLC7A11的結合，進而促進SLC7A11的

棕櫚?；?，增強膠質瘤細胞對鐵死亡的抵抗能力。

3. ZDHHC8/SLC7A11軸在膠質瘤中具有重要的致瘤性和臨床相關性：抑制ZDHHC8/SLC7A11軸可誘導鐵死亡并抑制膠質瘤生長,，且其高表達

與患者不良預后相關,，提示該軸可作為膠質瘤治療的潛在靶點。

參考文獻

Wang Z, Wang Y, Shen N, Liu Y, Xu X, Zhu R, Jiang H, Wu X, Wei Y, Tang J. AMPKα1-mediated ZDHHC8 phosphorylation promotes the palmitoylation

of SLC7A11 to facilitate ferroptosis resistance in glioblastoma. Cancer Lett. 2024 Mar 1;584:216619. doi: 10.1016/j.canlet.2024.216619. Epub 2024

Jan 9. PMID: 38211651.