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本實驗?zāi)P褪褂眯∈蟆⒋笫蟆⑼玫葎游锞稍炷#ㄟ^給予動物自由飲用不同濃度的DSS(MW:36000~50000)水溶液,,根據(jù)用藥時間及用藥周期可制成急性和慢性兩種結(jié)腸炎模型,。該模型癥狀表現(xiàn)與人類UC極為相似,主要表現(xiàn)為腹瀉,、黏液樣便,、糞便潛血、肉眼血便,、重量減輕,、活動度減少,毛色變差等,。
一,、實驗準備
1.實驗動物:C57BL/6或BALB/c,雌性,,6-8周,。每組至少8-10只小鼠。
2.造模試劑:DSS,,Mw 36000-50000,,含硫量17-20%。
3.DSS濃度:急性期模型通常為3-5%,,慢性期模型通常為1-3%,;可根據(jù)實驗需求及動物類型摸索濃度。該濃度為質(zhì)量體積比,,使用飲用水配置后,,過濾除菌。
二,、模型構(gòu)建
慢性與急性結(jié)腸炎模型的構(gòu)建時間分別為:8天與50天,,使用DSS濃度為3-5%和1-3%,之后脫頸,,取腸道組織,,進行相應(yīng)病理染色。
三,、如何評價造模是否成功
1)疾病活躍指數(shù)評分:
從三個方面進行評估打分,分別為體重,、糞便粘稠度,、糞便潛血等指標。
2)組織學(xué)變化評分:
a)潰瘍形成個數(shù),;
b)上皮細胞變化,;
c)炎癥浸潤;
d)淋巴結(jié)形成,;
組織學(xué)分析的標準方法為HE染色,。
3)結(jié)腸長度:
急性結(jié)腸炎模型中,,第8天可檢測到結(jié)腸長度縮短;慢性結(jié)腸炎模型中,,結(jié)腸長度縮短更加明顯,。
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