山東二手實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備回收在選擇色譜柱之前,,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu),、極性,、酸堿性、分子量大小等等,。
1.樣品是極性的且弱酸性的,;就可以選擇C18在*酸性水溶液條件下檢測(cè),即要選擇承受*純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強(qiáng),,或酸性太強(qiáng),;可以選擇CN,NH2,,或硅膠柱,,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng),,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,,否 則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái),,基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))
3.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),,或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡(jiǎn)單,,缺點(diǎn)是目前實(shí) 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,,價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn) 是不能用來(lái)分析其它樣品,,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱
4. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),,且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),,他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留,。
山東二手實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備回收注意事項(xiàng)
一、色譜柱被污染:
如果色譜柱開始使用時(shí)峰形正常,,使用一段時(shí)間后逐漸出現(xiàn)峰拖尾,,則色譜柱被污染的可能性很大。這時(shí)需要對(duì)色譜柱加強(qiáng)沖洗,,即使用比方法流動(dòng)相更強(qiáng)的溶劑沖洗色譜柱,。
建議做好樣品前處理,但如果前處理后依然比較臟,,強(qiáng)烈建議配置保護(hù)柱,。一旦峰形變差,柱效下降,,應(yīng)及時(shí)更換保護(hù)柱芯,。
二、柱外死體積:
較大的柱外死體積會(huì)導(dǎo)致峰形展寬和峰拖尾,,建議仔細(xì)檢查樣品經(jīng)過(guò)的所有管路和各連接部位,,使用合適的管線和接頭。
三,、樣品過(guò)載:
減小進(jìn)樣體積或稀釋樣品,。
四、樣品溶劑過(guò)強(qiáng):
樣品溶劑強(qiáng)度應(yīng)不高于流動(dòng)相洗脫強(qiáng)度,。使用流動(dòng)相溶解樣品或使用比初始比例流動(dòng)相洗脫能力更弱的溶劑溶解樣品,。
五、組分共流出:
如果一小峰包含在一大峰的后面,,需要做好色譜條件的優(yōu)化,,有條件時(shí)可利用PDAD檢查峰純度。
六,、流動(dòng)相pH值在樣品pKa附近:
流動(dòng)相pH值在樣品pKa附近時(shí),,樣品解離平衡不充分,容易出現(xiàn)前沿峰或拖尾峰,,所以流動(dòng)相pH值應(yīng)盡量選在樣品pKa±1.5以外,。
七、填料表面惰性不好:
鍵合硅膠型填料表面的殘留硅羥基或金屬雜質(zhì)易與待測(cè)化合物發(fā)生二次作用而導(dǎo)致拖尾,。建議:
1,、選用高純硅膠合成填料的色譜柱和進(jìn)行了有效硅羥基封端填料的色譜柱。
2,、降低流動(dòng)相pH值,,抑制硅羥基解離。
3,、流動(dòng)相中添加減尾劑,,如三乙胺。
4,、使用不同的有機(jī)溶劑,。