應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),石油,制藥 |
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產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
二手不銹鋼層析柱二手不銹鋼層析柱
層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,,一般用玻璃管或有機玻璃管,。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法,。
層析柱的直徑大小不影響分離度,,樣品用量大,可加大柱的直徑,,一般制備用凝膠柱,,直徑大于2厘米,但在加樣時應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上,。此外,, 直徑加大,洗脫液體體積增大,,樣品稀釋度大,。分離度取決于柱高,為分離不同組分,,凝膠柱床必須有適宜的高度,,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞,,一般不超過1米,。分族分離時用短柱,一般凝膠柱長20-30厘米,,柱高與直徑的比較5:1─10:1,,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級分離時柱高與直徑之線為20:1─100:1,,常用凝膠柱有50×25厘米,,10×25厘米,。層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,,被分離組分之間重新混合的可能性就大,,其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,,降低分辯力,。在精確分離時,死體積不能超過總床體積的1/1000
以中壓柱層析法提取分離冬凌草甲素為例:
1.吸附劑的處理及柱子裝填
將一定量薄層層析硅膠裝人搪瓷盤置于烘箱中,,于105,。C活化2H后,取出放置室溫即可裝柱,。柱子采用干法填充,,填滿整個柱體,不留死體積,,密封后用柱塞式計量溶劑泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵人溶劑,,至溶劑流出止。
2.上樣
將冬凌草的乙醇提取物400G用適量丙酮溶解,,泵人中壓柱柱頭,,然后泵人石油醚1000RID。
3.洗脫
以一定比例的石油醚一丙酮為洗脫液,,60ML/MIN的流速進行梯度洗脫,,柱的使用壓力為2~ 3KG/C 。按每份500ML收集,,TLC檢識展開劑(2:8),,顯色劑5%香草醛濃硫酸乙醇液
至洗脫*,相同流份合并,,回收溶劑,。將冬凌草甲素流份合并蒸干。加人適量甲醇熱溶后自然放置,,析出結(jié)晶,,為冬凌草甲素。
4.層析柱再生,、平衡
有效成分經(jīng)TLC檢識全部流出后,用純丙酮5000ML再生,,丙酮一