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Biometra-Mastercycler nexus 家族：

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*的flexlidTM 熱蓋,，可以自動調(diào)節(jié)高度，適應(yīng)從小體積PCR 管,、0.2 ml PCR 管,、0.5 ml PCR 管到各種規(guī)格的PCR 板。一臺Mastercycler nexus 梯度或普通PCR 儀可以連接兩臺Mastercycler nexus eco 經(jīng)濟型PCR 儀,，幫您顯著提高樣品處理通量,。

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BiometraPCR儀 - 技術(shù)原理：

DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑,。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下,，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝,。在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶,、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制,。 　

但是，DNA聚合酶在高溫時會失活,，因此,，每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶,，不僅操作煩瑣，而且價格昂貴,，制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展,。發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,，不需要每個循環(huán)加酶,，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,，并逐步應(yīng)用于臨床

1）內(nèi)參照法：在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標記,，下游引物不標記。在模板擴增的同時,，內(nèi)標也被擴增,。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高 效液相分離開來,，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板

2）競爭法：選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板,。在同一反應(yīng)管中,，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高 效液相將兩種產(chǎn)物分開,，分別測定熒光強度,，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)

3）PCR－ELISA法：利用生物素等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,，再加入生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物,，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗,，若加入內(nèi)標,，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的

2．內(nèi)標在傳統(tǒng)定量中的作

由于傳統(tǒng)定量方法都是終點檢測,，即PCR到達平臺期后進行檢測,，而PCR經(jīng)過對數(shù)期擴增到達平臺期時，檢測重現(xiàn)性極差。同一個模板在96孔PCR儀上做96次重復(fù)實驗,，所得結(jié)果有很大差異,，因此無法直接從終點產(chǎn)物量推算出起始模板量。加入內(nèi)標后,，可部分消除終產(chǎn)物定量所造成的不準確性,。但即使如此，傳統(tǒng)的定量方法也都只能算作半定量,、粗略定量的方法

建立樣品準備

這個區(qū)域?qū)ｉT用作樣品的準備,，在制備和操作用于核酸提取的試劑時應(yīng)該采取預(yù)防措施：⑴PCR產(chǎn)物和帶有要擴增序列的DNA克隆不能在這個房間操作。⑵組織培養(yǎng)物,、組織標本和血清樣品都帶進樣品準備間處理,，以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。⑶用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具,，也不能用作操作靶序列,。⑷DNA樣品應(yīng)該用有專門的防護或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時有氣溶膠遺留,。⑸大體積樣品應(yīng)該用單獨包裝的無菌一次性移液管吸取,。⑹管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生，而且管子不能用力崩開,，這樣會產(chǎn)生氣溶膠,。⑺任何時候都應(yīng)該穿實驗服和帶手套，手套要經(jīng)常更換,，尤其在抽提過程中每一步之間都要更換,。實驗服要專門用于樣品準備間，經(jīng)常清洗

2,、樣品準備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,，這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題,，反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準備區(qū)進行,。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報道

3、建立前PCR區(qū)

該去專門用于準備各種反應(yīng),，這個區(qū)域必須保持干凈,，而且沒有來自克隆和樣品準備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準備,，特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管,。

Biometra PCR儀售后服務(wù)承諾：

（1） 嚴格按維修程序及操作規(guī)程維修，確保維修質(zhì)量,。

（2） 嚴把配件質(zhì)量關(guān)，杜絕偽劣配件的使用。

（3） 服務(wù)熱線24小時有人值班,，24小時內(nèi)做出回應(yīng),。維修車間及前臺節(jié)假日和周六日不休息，保證用戶隨到隨修,；建立上門維修制度,；及時成立搶修小組，可隨時 到達現(xiàn)場搶修,。

（4） 收費方面嚴格執(zhí)行我公司《維修收費標準》,，更換舊件返還給客戶，不夸大故障,，杜絕亂收費,。

（5） 外地顧客遠程故障判斷、技術(shù)故障解答,、需要郵遞配件迅速辦理,。外地客戶自行送修的我們會加急為您的機器排除故障，當(dāng)天加急完成維修,。

（6） 經(jīng)我中心維修的機器一律實行保修,，保修期為三個月，在保修期內(nèi)如因維修質(zhì)量或更換配件質(zhì)量出現(xiàn)問題,，我中心負責(zé)返修,。

（7） 客戶在我中心維修過機器，可憑收費單據(jù)及保修單在我公司再次維修此機器時,，享受維修費半價待遇,。

（8） 建立回訪制度：定期對我公司維修過的機器使用情況以及我公司的服務(wù)質(zhì)量情況進行跟蹤了解，向用戶調(diào)查滿意率,、建立用戶滿意率調(diào)查表,。

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