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三糖鐵實(shí)驗(yàn)操作視頻
播放：2010 上傳時(shí)間：2022-07-18簡(jiǎn)介：
三糖鐵試驗(yàn)常用于沙門(mén)氏菌,、志賀氏菌,、副溶血性弧菌等致病菌的生化鑒定和初篩。相比較于克氏雙糖鐵,，三糖鐵中增加了蔗糖,，擴(kuò)大了非目標(biāo)菌的排除范圍，增加了初篩的能力,。
注：做弧菌的生化鑒定時(shí),，通常使用含1%或3%氯化鈉的三糖鐵瓊脂。
第一步：培養(yǎng)基制備
若使用干粉培養(yǎng)基自行制備三糖鐵斜面需要注意配時(shí)一定要加熱煮沸并不停攪拌至瓊脂*溶解,，才能分裝試管,。不然會(huì)因?yàn)榄傊瑳](méi)有*溶解，造成有些試管不凝固,，或凝固不*的情況,。
將分裝好的試管放入滅菌鍋滅菌。
滅菌結(jié)束后,，將試管擺成高層斜面狀,，斜面/底層 ≈ 2/3
若使用一次性塑料試管，則需將培養(yǎng)基滅菌后再進(jìn)行無(wú)菌分裝,，擺高層斜面,。（畫(huà)面：一次性塑料試管圖片）。
也可直接使用海博生物成品三糖鐵管進(jìn)行實(shí)驗(yàn),，免去繁瑣的配制過(guò)程,。
第二步：接種待測(cè)菌
用接種挑取待測(cè)菌落，在斜面上“之"字形劃線，再于底層穿刺（穿刺底層深度2/3左右即可）,，
培養(yǎng)過(guò)程中必須確保試管透氣性良好,，使用成品三糖鐵管時(shí)不可將蓋子蓋緊，之后將培養(yǎng)基置于36±1℃培養(yǎng)18-24h后,，觀察結(jié)果,。
現(xiàn)象觀察
斜面或底層
若為紅色，則為產(chǎn)堿,，常用“K"表示,；
若出現(xiàn)變黃，則為產(chǎn)酸,，常用“A"表示,；
底層若有變黑出現(xiàn)，則為硫化氫陽(yáng)性,；
若底層出現(xiàn)氣泡或瓊脂出現(xiàn)斷層,，則為產(chǎn)氣陽(yáng)性。
斜面紅,、底層黃的K/A型：此類(lèi)細(xì)菌僅能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸,，不能發(fā)酵乳糖和蔗糖，如大多數(shù)的沙門(mén)氏菌,、志賀氏菌,、副溶血性弧菌等；
斜面和底層均為黃色的A/A型：此類(lèi)細(xì)菌則至少能發(fā)酵乳糖和蔗糖其一,，如大腸桿菌、普通變形桿菌,、霍亂弧菌等,；
斜面和底層均為紅色的K/K型：此類(lèi)細(xì)菌通常不能發(fā)酵葡萄糖或僅能有氧分解葡萄糖，如銅綠假單胞菌,、糞產(chǎn)堿桿菌等,；
多數(shù)沙門(mén)氏菌、大腸桿菌,、變形桿菌可以產(chǎn)氣,，出現(xiàn)氣泡或斷層；
產(chǎn)硫化氫的沙門(mén)氏菌和變形桿菌等底部可以觀察到變黑現(xiàn)象,。
