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青島高科技工業(yè)園海博生物有限公司 |
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R2A瓊脂培養(yǎng)基（2015藥典）
英文名稱： R2A Agar
產(chǎn)品貨號： HB0167-5
產(chǎn)品規(guī)格： 250g
產(chǎn)品價格： 240元
產(chǎn)品用途： 用于純化水中菌落總數(shù)的測定
配方：
酵母浸出粉 0.5
蛋白胨 0.5
酪蛋白水解物 0.5
葡萄糖 0.5
可溶性淀粉 0.5
磷酸氫二鉀 0.3
無水硫酸鎂 0.024
丙酮酸鈉 0.3
瓊脂 15.0
pH值7.2 ± 0.2 25℃
用法：稱取本品18.18g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。
檢驗原理：酵母浸出粉,、蛋白胨,、酸蛋白水解物提供氮源,、維生素、生長因子,；葡萄糖,、為可發(fā)酵糖類；可溶性淀粉可以吸收菌在復(fù)蘇過程產(chǎn)生的有害物質(zhì),；丙酮酸鈉可增強(qiáng)細(xì)菌的復(fù)蘇,。磷酸氫二鉀為酸堿緩沖劑；無水硫酸鎂提供二價陽離子,；瓊脂為凝固劑,。
不同藥典關(guān)于純化水的微生物檢測方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
中國藥典
【檢查】 微生物限度 取本品不少于 1ml，按薄膜過濾法處理后,，采用 R2A 瓊脂培養(yǎng)基,，30～35℃培養(yǎng)不少于 5 天，依法檢查（通則 1105）,，每1ml 供試品中需氧菌總數(shù)不得過 100cfu,。
操作簡述：
除葡萄糖、瓊脂外,，取上述成分,，混合，微溫溶解,，調(diào)節(jié) pH 值使加熱后在 25℃的 pH值為 7.2±0.2,，加入瓊脂，加熱溶化后,，再加入葡萄糖,，搖勻，分裝,，滅菌,。 R2A 瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查試驗 照通則 1105 中“計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查”的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查方法進(jìn)行，試驗菌株為銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌,。應(yīng)符合規(guī)定,。
USP標(biāo)準(zhǔn)
在美國藥典中，推薦使用0.45μm薄膜過濾法,，并同時使用高營養(yǎng)培養(yǎng)基（平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（PCA））于30-35℃培養(yǎng)72小時以上,，和低營養(yǎng)培養(yǎng)基（R2A瓊脂）于20-25℃培養(yǎng)96小時以上。檢測標(biāo)準(zhǔn)為：≤100cfu/ml ,。
操作簡述：（可根據(jù)實際情況調(diào)整）
量取10ml充分混勻的水樣,，以無菌操作加入安裝好的薄膜過濾器內(nèi)，過濾,。并用 pH7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜,，每張濾膜每次沖洗量為100ml,共沖洗1次,。過濾后，取出濾膜,，正面朝上貼于瓊脂平板上,。共制備 2張濾膜，一張濾膜貼于平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板（高營養(yǎng)培養(yǎng)基）置30℃~35℃生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)2~3天,，計數(shù),。另一張濾膜貼于R2A瓊脂平板（低營養(yǎng)培奍基），置20℃~25℃生化培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)5~7天,，計數(shù)。以培養(yǎng)基平板上菌落數(shù)生長較多者作為檢測結(jié)果,， 按比例折算為1ml純化水中的微生物數(shù)量后報告,。
EP標(biāo)準(zhǔn)
在歐洲藥典中使用薄膜過濾法（0.45μm 孔徑濾膜），使用 R2A 瓊脂培養(yǎng)基在 30℃～35℃培養(yǎng) 5 天以上,。 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：≤100cfu/mL,。
操作簡述：（可根據(jù)實際情況訓(xùn)整）
量取 10ml 充分混勻的水樣，以無菌操作加入 安裝好的薄膜過濾器內(nèi),，過濾,。并用 pH7.0 的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜,每張濾膜 每次沖洗量為 100ml，共沖洗 1 次,。過濾后,，取出濾膜，正面朝上貼于 R2A 瓊脂平板上, 置 30℃～35℃生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng) 5 天,，計數(shù),。按比例折算為 1ml 純化水中的微生物數(shù)量后 報告。
R2A瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典)微生物靈敏度試驗:
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置30-35℃需氧培養(yǎng)48-120小時。
注：回收率計算時,，用R2A瓊脂做對照培養(yǎng)基,。
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