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氨基酸脫羧酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基使用方法
閱讀:171 發(fā)布時(shí)間:2024-8-30提 供 商 | 青島高科技工業(yè)園海博生物有限公司 | 資料大小 | 22.2KB |
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稱取本品0.4g,,加入0.5g L-氨基酸(或鹽酸鹽),,溶解于100mL蒸餾水中,用1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH,,使滅菌后在6.8左右(不同形式的氨基酸pH不同,,因此加入氨基酸后需對培養(yǎng)基的pH進(jìn)行調(diào)整),分裝于試管,,并覆蓋液體石蠟,,121℃滅菌15min,冷卻后備用,。
注意事項(xiàng):1.氨基酸有L型和D型,,通常需要使用的是L型氨基酸,若使用的氨基酸為L型D型混合的,,配制培養(yǎng)基時(shí)需將氨基酸的量加倍(即添加量為1g/100mL),;2.不同的氨基酸pH有差異,一般呈堿性,,但市場上售賣的氨基酸多為鹽酸鹽形式(鹽酸鹽形式的氨基酸更為穩(wěn)定,,不易變質(zhì)),一般呈酸性,,因此配制培養(yǎng)基時(shí),,加入氨基酸后必須對培養(yǎng)基的pH進(jìn)行調(diào)整;3.在厭氧環(huán)境下更有利于保存細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)生的酸,,及促進(jìn)氨基酸脫羧酶的產(chǎn)生,,因此需覆蓋液體石蠟隔絕氧氣,不覆蓋石蠟有可能導(dǎo)致結(jié)果不正確,。4.有些細(xì)菌的氨基酸脫羧酶產(chǎn)生較慢,,因此在遇到陰性試驗(yàn)結(jié)果時(shí),有時(shí)需延長培養(yǎng)數(shù)天才可觀察到陽性結(jié)果,。5.本試驗(yàn)的原理是細(xì)菌前期分解葡萄糖產(chǎn)酸,,后期分解氨基酸產(chǎn)堿,培養(yǎng)基呈現(xiàn)由紫色變黃再變紫的過程,,最終陽性結(jié)果為紫色,,但有些細(xì)菌不能分解葡萄糖產(chǎn)酸,培養(yǎng)基全程都是紫色,,此時(shí)容易誤判為陽性結(jié)果,,因此在進(jìn)行氨基酸脫羧酶試驗(yàn)是,,需要同時(shí)接種對照管(即不添加氨基酸的培養(yǎng)基管),當(dāng)對照管與試驗(yàn)管均為黃色時(shí)為陰性反應(yīng),,當(dāng)對照管為黃色,,試驗(yàn)管為紫色時(shí),為陽性反應(yīng),,若對照管未變黃,,說明細(xì)菌為產(chǎn)堿型或氧化型,不能直接判斷陰陽性,。