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常用染料的溶解方法和注意事項(xiàng)
閱讀:57 發(fā)布時(shí)間:2025-1-17一,、培養(yǎng)基與染料
培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì),、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及生長(zhǎng)素和水等,。有的培養(yǎng)基還含有染料,、抗菌素、激素和血清等,。不同的培養(yǎng)基需要添加的染料不同,常用的染料有中性紅,、苯fen紅、溴jia酚紫,、結(jié)晶紫,、溴麝香草酚藍(lán),、品紅,、伊紅、美蘭,、孔雀綠等,。經(jīng)常見到有的人在配制培養(yǎng)基的過程中,其他成分都溶解了,,最后加染料后,,溶解不徹-底的情況,結(jié)果不得不重新配制,往往重復(fù)幾次依然找不到原因,,既浪費(fèi)了原料,,又耽誤了時(shí)間,影響試驗(yàn)的順利進(jìn)行,。本文主要就培養(yǎng)基中染料的溶解方式做簡(jiǎn)單介紹,,希望能給大家提供幫助。
二,、染料的分類
根據(jù)染料的溶解媒介,,可以將常用染料大致分為3類:水溶性染料、醇溶性染料和堿溶性染料,。顧名思義,,水溶性染料就是指只用純水就能完-全溶解,形成透明溶液的染料,;而醇溶性染料和堿溶性染料則需要分別在醇類或堿性介質(zhì)中才能進(jìn)行徹-底溶解,,如果只用水是不能溶解的(如圖1)。生物實(shí)驗(yàn)室常見的染料溶解特性相關(guān)內(nèi)容,,可參考
圖1-1 中性紅在水中的溶解狀態(tài)
圖1-2 苯fen紅在水和稀堿溶液中的溶解狀態(tài)
圖1-3 溴甲fen紫在水和乙醇中的溶解狀態(tài)
圖1 三種染料在不同溶劑中的溶解狀態(tài)
三,、溶解介質(zhì)對(duì)培養(yǎng)基的影響
經(jīng)常有人會(huì)質(zhì)疑,如果培養(yǎng)基中加入了過多的非水溶劑(乙醇或堿液),,是否會(huì)對(duì)培養(yǎng)基的性能造成影響,,至少會(huì)引起培養(yǎng)基的pH值變化。
首先,,在配制染料溶液時(shí),,并不是全部的溶劑都用乙醇或堿液,通常只需滴加幾滴或幾毫升溶劑,,讓染料充分溶解,分散開以后,,再用純化水定容至所需容量就可以了,。
其次,培養(yǎng)基中染料的添加量是很少的,,尤其是做成母液后使用,,每升培養(yǎng)基中只需加幾毫升甚至更少,引入的乙醇或堿液很少,。
另外,,乙醇不會(huì)引起培養(yǎng)基pH值變化,少量堿液就算會(huì)引起pH稍有影響,,配制好了再微調(diào)一下就行了,。正常配制培養(yǎng)基,也都要用稀酸或稀堿對(duì)pH進(jìn)行調(diào)節(jié)的。
綜合來看,,少量非水溶劑對(duì)培養(yǎng)基本身造成的影響可以忽略不計(jì),。
四、具體操作
下面以苯fen紅為例,,詳細(xì)說明一下染料溶液的配制過程,。
(1)首先,查一下苯fen紅的特性:苯fen紅為鮮紅至深紅色結(jié)晶或細(xì)小結(jié)晶性粉末,,在空氣中穩(wěn)定,;1g溶于約1300mL水,約350mL乙醇,,500mL丙酮,;易溶于氫氧hua鈉或碳酸鈉溶液中呈紅色,與鋅fen共沸褪色,;幾乎不溶于yi醚和氯fang,。
經(jīng)確認(rèn),該染料為堿溶性染料,,準(zhǔn)備好稀堿溶液(本實(shí)驗(yàn)室通常用1mol/L的NaOH或Na2CO3),;
(2)稱量所需染料至玻璃容器(錐形瓶或燒杯),如圖2-1,;
圖2-1 容器中的染料
(3)滴入幾滴堿液,,輕輕搖晃容器,直至染料均勻分散,,無顆粒物,,如圖2-2;
圖2-2 滴入堿液并搖晃后,,染料的狀態(tài)
(4)用純化水定容至所需容積,,搖勻即可備用,如圖2-3,。
圖2-3 溶解好的染料溶液
五,、補(bǔ)充說明
實(shí)驗(yàn)過程中常用的染料都可以用上面的方法進(jìn)行溶液配制。有些染料本身是水溶性的,,熱水中溶解度更高,,可以稍稍加熱促進(jìn)其溶解。但對(duì)于需要醇溶或堿溶的染料,,如果只用水,,即使加熱也達(dá)不到溶解的目的。所以首先要選對(duì)溶劑,,這一點(diǎn)非常重要,。如果濃度太大,有少量顆粒,還可以借助超聲儀進(jìn)行溶解,。
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載,。