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ZUI低抑菌濃度(MIC)測定-MH肉湯稀釋法
閱讀:223 發(fā)布時間:2024-10-31一,、原理
用MH肉湯將抗菌藥物進(jìn)行一系列稀釋后,,定量接種待檢菌,培養(yǎng)后進(jìn)行觀察,,抑制待檢菌肉眼可見生長的最DI藥物濃度,,即為該藥物對待檢菌的ZUI低抑菌濃度(MIC)。該結(jié)果對于臨床上的細(xì)菌感染治療或動物感染治療具有重要的指導(dǎo)意義,。
二,、操作方法
1.澄清MH肉湯培養(yǎng)基干粉21g,加熱溶解于1000mL純化水中,,分裝至小試管,,第一管分裝4mL,后面每管分裝2mL,,121℃滅菌15min,。也可先將培養(yǎng)基滅菌,后分裝于無菌試管,。
2.將試管進(jìn)行編號,,在第一支管中加入相應(yīng)的抗菌藥物,使抗菌藥物濃度為128mg/L,,混合均勻,,吸取2mL加入至第二支試管中混合均勻,再吸取2mL加入至第三支試管中混合均勻,,依次操作至第十三支試管,,將第十三支試管吸取2mL舍去,,此時第1-13管的藥物濃度依次為128、64,、32,、16、8,、4,、2、1,、0.5,、0.25、0.125,、0.0625,、0.03125mg/L(也可根據(jù)實(shí)際情況改變藥物濃度或增加稀釋度),第14和15支試管不含抗菌藥物,。
3.將活化好的待測菌株用生理鹽水制成含菌量為107CFU/mL的菌懸液,,向第1-14支試管中分別加入0.1mL菌懸液,置35-37℃培養(yǎng)18-24h(或其他適宜的生長條件),,觀察生長情況,。
三、生長現(xiàn)象
以野生分離到的一株大腸桿菌為例,,測試多粘菌素B對該菌的zui低抑菌濃度,,結(jié)果如下圖,第1-9支試管澄清,,第10支試管開始有明顯渾濁生長,,說明多粘菌素B對該大腸桿菌的zui低抑菌濃度為0.5mg/L。
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