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乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
閱讀:472 發(fā)布時(shí)間:2024-6-20一、用途:
用于乳酸菌的分離培養(yǎng),。
二,、實(shí)驗(yàn)原理:
胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源,、維生素,、生長(zhǎng)因子;葡萄糖提供碳源,;磷酸氫二鉀為緩沖劑,;枸櫞酸三銨、硫酸鎂,、硫酸錳,、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長(zhǎng)因子,,吐溫80為乳酸桿菌提供所需的代謝脂肪酸,;檸檬酸銨和乙酸鈉能夠抑制一些雜菌的生長(zhǎng),包括鏈球菌,、霉菌和除乳酸桿菌外的大多數(shù)口腔微生物菌群,;加入乙酸,使pH值降低,,抑制了其它細(xì)菌的生長(zhǎng),,有利于乳酸桿菌的分離,;加入碳酸鈣是由于乳酸菌在培養(yǎng)基中產(chǎn)酸可以形成溶鈣環(huán),便于區(qū)分,;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑,。
三、培養(yǎng)基配方(g/L):
酵母浸粉 | 2.0 |
胰酪蛋白胨 | 10.0 |
磷酸二氫鉀 | 2.0 |
牛肉浸粉 | 10.0 |
硫酸鎂 | 0.2 |
葡萄糖 | 20.0 |
乙酸鈉 | 5.0 |
枸櫞酸三銨 | 2.0 |
硫酸錳 | 0.05 |
碳酸鈣 | 5.0 |
吐溫80 | 1.0 |
瓊脂 | 25.0 |
pH 6.0-6.5 25℃ |
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成分以獲得最佳的結(jié)果
四,、試驗(yàn)方法:
1,、稱取本品82.25g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,,分裝三角瓶,每瓶 200ml,,115℃高壓滅菌 15-20min,冷至 50℃左右時(shí),,傾入無(wú)菌平皿,,備用。
2,、制備質(zhì)控菌液,。
3、用1μL接種環(huán)取非目標(biāo)菌質(zhì)控菌液1環(huán),,將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體,,在平板表面劃三區(qū),同時(shí)接種兩個(gè)平板,。
4,、36±1°C下培養(yǎng)24-48小時(shí),記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
五,、結(jié)果觀察與解釋:
接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃下培養(yǎng)24-48小時(shí):
質(zhì)控菌株 | 菌株編號(hào) | 接種量(CFU) | 方法 | 質(zhì)控評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) | 其他特征 |
嗜酸乳桿菌 | CICC6005 | / | 定性 | +++ | 白色突起菌落,,有溶鈣環(huán) |
植物乳桿菌 | ATCC8014 | / | 定性 | +++ | 白色突起菌落,,有溶鈣環(huán) |
圖1 植物乳桿菌微生物質(zhì)控結(jié)果
六、注意事項(xiàng):
本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分,,需做其他補(bǔ)充試驗(yàn),。
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。