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更新時(shí)間：2024-12-07 11:07:28瀏覽次數(shù)：5967評(píng)價(jià)
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LunaGel™ Extracellular Matrix
用于3D細(xì)胞和類器官培養(yǎng)的,，3D細(xì)胞培養(yǎng)儀
可直接使用的光交聯(lián)細(xì)胞外基質(zhì)試劑盒
LunaCrosslinker™
可見(jiàn)光交聯(lián)系統(tǒng)
1. 培養(yǎng)貼壁癌細(xì)胞（如腸癌,、胃癌,、肝癌）需要選擇哪種試劑盒？培養(yǎng)懸浮生長(zhǎng)的免疫細(xì)胞（如NK細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞）應(yīng)該選擇哪種試劑盒,？
答：所有的LunaGel明膠試劑盒都適合培養(yǎng)貼壁癌細(xì)胞，是LunaGel豬皮明膠和LunaGel牛骨明膠,。對(duì)于培養(yǎng)免疫細(xì)胞,，建議使用LunaGel牛骨明膠，因?yàn)槠鋬?nèi)毒素水平比LunaGel豬皮明膠低很多,。
近期會(huì)推出一種專門針對(duì)免疫細(xì)胞的新試劑盒,，它使用超純的明膠（沒(méi)有內(nèi)毒素）
2. 細(xì)胞樣品需要預(yù)處理嗎？如何預(yù)處理,？
答：不需要預(yù)處理,。細(xì)胞從組織中提取，通過(guò)離心法制備顆粒,，然后將細(xì)胞顆粒重新懸浮在LunaGel溶液中,，并用移液管將溶液送到孔板進(jìn)行交聯(lián)。
3 一個(gè)試劑盒可以合成多少ml凝膠,？
答：每盒10ml,。
4. 固化后是否還需要浸入培養(yǎng)基維持生長(zhǎng)？基質(zhì)中是否含有生長(zhǎng)因子,？如何自己添加生長(zhǎng)因子,？
答：光凝膠不含生長(zhǎng)因子。如果需要添加,，最好在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加生長(zhǎng)因子,。
5. 將液態(tài)試劑-細(xì)胞混合物加入PDMS容器后再進(jìn)行固化會(huì)影響交聯(lián)過(guò)程嗎？交聯(lián)儀器對(duì)PDMS有什么影響嗎,？
答：不會(huì),。
6. 凝膠中的孔隙有多大？培養(yǎng)基,、細(xì)胞因子等液體可以流過(guò)嗎,？還是只能依靠擴(kuò)散？我們希望液體可以穿過(guò)基質(zhì)的孔隙,，基質(zhì)能否承受住流體剪切力,？會(huì)被沖碎嗎？細(xì)胞能在基質(zhì)中拉伸和遷移嗎,？
答：孔隙的大小取決于凝膠的硬度,，在月交聯(lián)劑中交聯(lián)度越長(zhǎng),，毛孔越小，凝膠變得越硬,。然而,，即使是非常硬的凝膠也會(huì)允許基質(zhì)和細(xì)胞因子通過(guò)擴(kuò)散順利的通過(guò)凝膠，細(xì)胞存活率通常超過(guò)90-95%,。這種凝膠可以承受流體剪切力而不會(huì)破裂,，除非凝膠非常軟（交聯(lián)時(shí)間小于30秒在LunaCrosslinker中的光照）。凝膠被交聯(lián)到大約1.2kpa的數(shù)（50秒交聯(lián)）,，在沒(méi)有破裂的情況下注入基質(zhì),。
7. 由于我們希望收集基質(zhì)中的細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)的ELISA或毒性、代謝組學(xué)測(cè)定,，GC-MS等,，所以問(wèn)基質(zhì)能否被降解？或者細(xì)胞能否被取出來(lái)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),？基質(zhì)本身的成分是否會(huì)影響這些實(shí)驗(yàn),。
答：是的，所有光凝膠基質(zhì)都可以根據(jù)膠原酶制造商的說(shuō)明書(shū)用膠原酶降解,。我們會(huì)新出一款試劑盒,，*優(yōu)化和即用的LunaGel細(xì)胞釋放試劑盒，它允許細(xì)胞在30分鐘內(nèi)從凝膠中回收,，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),，而不會(huì)影響無(wú)菌狀態(tài)?？梢赃M(jìn)行大多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)分析：如毒性,、代謝活性、免疫熒光,、 Qrt-PCR等,，不會(huì)降解凝膠。在這種情況下,，將試劑（如Alamar Blue 等）直接加入凝膠樣品的井中,，并以與單層貼壁細(xì)胞相同的方式進(jìn)行測(cè)量。如果對(duì)細(xì)胞內(nèi)蛋白感興趣,，可以釋放細(xì)胞/降解凝膠。,，凝膠的組成并不是很重要,，它們都會(huì)在膠原酶的作用下降解，除了透明質(zhì)酸酶才能降解的LunaGel透明質(zhì)酸試劑盒,。
8. 如果進(jìn)行免疫熒光拍攝需要在細(xì)胞樣品與試劑盒混合前加入染料還是細(xì)胞可以在凝膠中被染色,？“血管細(xì)胞形成毛細(xì)血管"3D熒光標(biāo)記圖怎么拍,，是直接將標(biāo)記好熒光的骨架放到共聚焦顯微鏡下拍攝嗎？
答：免疫熒光的方法與用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)方法非常相似,。但是,，由于3D樣本中的擴(kuò)散較慢，因此需要延長(zhǎng)孵化步驟,。例如,，按照我們的方法制作細(xì)胞凝膠，在介質(zhì)中（基質(zhì)）中培養(yǎng)（7天或者14天）,，然后固定它們（例如,，用4%的多聚甲醛固定1小時(shí)），并將他們儲(chǔ)存在4度的緩沖液（PBS）中,，直到您準(zhǔn)備好染色,，對(duì)于染色，首*行封閉（5%BSA或者緩沖液中的血清）,，然后在封閉緩沖液清洗2-3次,，每次60分鐘，以清洗游離抗體,。洗滌后,，用DAP（如果需要）在阻擋緩沖液中加入輔料，孵化過(guò)夜,。最后再洗2-3次,，每次60分鐘，并保存樣品知道成像,。
是的,，這張照片是在共聚焦顯微鏡下拍攝。
9. Corning的356234,、356235,、356237、356230,、356231,、354248，這些產(chǎn)品和Gelomics一樣嗎,？Corning的產(chǎn)品包裝有5ml和 10ml,，而Gel的只有1g，這個(gè)1g的凝膠組對(duì)應(yīng)的Corning的產(chǎn)品用量是多少,？
答：Corning的356234,、356235、356237,、356230,、356231,、354248都是相同材質(zhì)的（matrigel），只是濃度和體積不同,。Martrigel的直接替代品是Gelonomy LunaGel 可光交聯(lián)性細(xì)胞外基質(zhì)（10ml）低硬度（所有豬,、牛、魚(yú)都可以使用）,，與LunaCrossLinker相結(jié)合,。
GelMA更適合用于再生醫(yī)學(xué)/3D打印，它是一種干燥的材（1g）,，但客戶可以將其溶解在10-20ml的溶液里,，具體取決于 使用者情況。如果溶解在10ml的溶液中,，GelMA濃度較高（100mg/ml）,，材料會(huì)比濃度較低時(shí)（20ml體積，50mg/ml）更硬,。
10. 有沒(méi)有對(duì)應(yīng)Corning貨號(hào)的逐一替代品,。
答：不同的Corning貨號(hào)產(chǎn)品其實(shí)都是同一產(chǎn)品的變體，只是濃度和體積不同,。
替代產(chǎn)品 | ||
當(dāng)前產(chǎn)品 | 名字 | 說(shuō)明與應(yīng)用 |
凝膠 基底膜提取物 356234 356235 356237 356230 356231 354248
| 月光凝膠可光交聯(lián)ECM-豬凝膠,、低硬度 SKU0002
月光凝膠可光交聯(lián)型ECM-牛明膠，低硬度 SKU0005
月光凝膠可光交聯(lián)型ECM-魚(yú)凝膠,，低硬度 SKU0014 | 皮膚來(lái)源的細(xì)胞外基質(zhì),。適用于大多數(shù)細(xì)胞類型，包括MSCs,、IPSC,、類器官細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞,、癌球細(xì)胞
骨源性細(xì)胞外基質(zhì),，內(nèi)毒素含量低。 適用于大多數(shù)細(xì)胞類型,，特別是骨相關(guān)細(xì)胞類型,，包括充質(zhì)干細(xì)胞，成骨細(xì)胞等,，以及內(nèi)毒素敏感細(xì)胞類型（巨噬細(xì)胞和免疫細(xì)胞）
魚(yú)皮提取的細(xì)胞外基質(zhì),，較低的粘度，自動(dòng)化液體處理,。適用于大多數(shù)細(xì)胞類型,，包括MSCs、IPSC,、類器官細(xì)胞,、內(nèi)皮細(xì)胞、癌球細(xì)胞 |
12. Corning的產(chǎn)品已經(jīng)上市30年了,，非常老的技術(shù),，他們沒(méi)有月光凝膠的產(chǎn)品。
13. 目前在中國(guó)沒(méi)有銷售,，但有國(guó)際客戶
Terasaki Institute for Biomedical Innovation
寺崎生物創(chuàng)新研究所 洛杉磯
Prof Molly Stevens （Imperial College London）
英國(guó)帝國(guó)理工學(xué)院 Molly Stevens教授
我們最新的競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手分析,，演出于2022年1月，確定了總 共21個(gè)已建立的,，和12家初創(chuàng)公司,。總部設(shè)在美國(guó)(60%),，歐洲(25%)和亞太地區(qū)地區(qū)(15%),。到目前為止最大的場(chǎng)份額由以下產(chǎn)品占據(jù)：
天然原產(chǎn)地，如Matrigel,，
海藻酸鹽,、膠原蛋白等。
天然生物材料是一類
從以下位置提取的材質(zhì)含有最di限度的組織或植物操縱,。Matrigel,，一款產(chǎn)品，由康寧公司制造,，是一種自然界最hao的例子,。生物材料一直是第一個(gè)在近30年前引入直到今天，市場(chǎng)仍然存在領(lǐng)xian的產(chǎn)品,。一般來(lái)說(shuō),，自然的生物材料提供了一種細(xì)胞外微環(huán)境，具有很高的生物活性,，因此與細(xì)胞交互以指示它們來(lái)建造類似人類的組織,。
然而，天然材料也承受著批次之間的顯著變化,，具有粘性,，很難使用，通常會(huì)限制用戶調(diào)整影響細(xì)胞行為的重要參數(shù),，如細(xì)胞外基質(zhì)硬度,。其他公司提供*合成的人造細(xì)胞外基質(zhì)材料，如Q-Gel Bio的Q-Gel,。它們提供了增強(qiáng)的重復(fù)性和可調(diào)性,，但非常昂貴，并且缺乏天然基質(zhì)的生物活性,。另一方面,，GelEconomics使用的是所謂的半合成材料,。結(jié)合了兩者的優(yōu)點(diǎn)，這些天然衍生材料經(jīng)過(guò)內(nèi)部化學(xué)修飾,，提供了合成材料的可調(diào)性和再現(xiàn)性,，同時(shí)保留了天然材料的固有生物活性。
以下是我們競(jìng)爭(zhēng)的三大企業(yè),，它們做得好和不好的是什么
Corning | Advanced Biomatrix | Q-Gel Bio | |
產(chǎn)品描述 | 從小鼠腫瘤中提取的基底膜提取物天然和未經(jīng)修飾的生物材料 | 各種天然和半合成的細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)品（如鼠尾或者牛膠原蛋白） | 合成設(shè)計(jì)的細(xì)胞外基質(zhì) |
優(yōu)勢(shì) | 具有高生物活性的細(xì)胞外基質(zhì),，是市場(chǎng)的領(lǐng)xian者 | 提供的產(chǎn)品種類繁多，主導(dǎo)產(chǎn)品以天然提取的膠原蛋白為基礎(chǔ),，具有中等生物活性 | 定義基質(zhì)膠的組成,，矩陣屬性在小范圍內(nèi)可調(diào),，與實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化兼容 |
劣勢(shì) | 重復(fù)性差,，機(jī)械性能不可控且顯著低于天然組織,，產(chǎn)品制造在倫理上具有挑戰(zhàn)性，需要?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)和犧牲,，3D細(xì)胞培養(yǎng)模型的準(zhǔn)備期長(zhǎng)（4-8小時(shí)手動(dòng)）,，產(chǎn)品需要持續(xù)冷卻，與實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化不兼容,，成本高,。產(chǎn)品作為單獨(dú)項(xiàng)目銷售，方案必須由客戶自己開(kāi)發(fā)（時(shí)間,、成本密集型）,，產(chǎn)品需要額外的技術(shù)/設(shè)備 | 產(chǎn)品作為單獨(dú)項(xiàng)目銷售，方案必須由客戶自己開(kāi)發(fā)（時(shí)間,、成本密集型）,，產(chǎn)品需要額外的技術(shù)/設(shè)備，這不是Advanced Biomatrix提供的,，天然細(xì)胞外基質(zhì)必須在準(zhǔn)備過(guò)程中不斷冷卻,。 | 生物活性有限，成本非常高 |
我們的做法不同 | 我們的產(chǎn)品具有天然生物活性和合成材料的可調(diào)性和重復(fù)性,，不同批次之間沒(méi)有顯著差異,，使用方便快捷，室溫下工作,，價(jià)格較低,，與實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化兼容 | 我們銷售的產(chǎn)品套件包含*優(yōu)化的即用材料，降低了進(jìn)入門檻,，即使經(jīng)驗(yàn)不足的研究人員也可以直接進(jìn)入3D細(xì)胞培養(yǎng),。 | 我們的產(chǎn)品既具有天然材料的生物活性，又具有合成材料的可調(diào)性和重現(xiàn)性，價(jià)格明顯更低 |
我們的3D細(xì)胞培養(yǎng)儀與競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的產(chǎn)品相比如何的圖表如下所示,。
價(jià)值主張與競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)
總結(jié)為什么我們的產(chǎn)品更好,。
世界各地的科學(xué)家和研究人員迫切需要更好的實(shí)驗(yàn)室模型系統(tǒng)，以克服與傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題,。重要的是,，這個(gè)問(wèn)題的潛在解決方案不僅必須具有生物學(xué)意義，而且還必須易于使用,，提供高水平的實(shí)驗(yàn)控制，具有可重復(fù)性,，并以經(jīng)濟(jì)的價(jià)格克服進(jìn)入障礙,，成為用戶日常工作流程的一部分。這正是Gelonomy的產(chǎn)品所提供的,！
我們的價(jià)值主張如下圖所示,。
相比以前的產(chǎn)品和與之競(jìng)爭(zhēng)的產(chǎn)品，LunaGelTM技術(shù)具有廣泛的優(yōu)勢(shì),。如本文件前面幾節(jié)所述,，我們的半合成生物材料和交聯(lián)劑技術(shù)的主要優(yōu)勢(shì)是：
-LunaGelTM光交聯(lián)技術(shù)提供了最gao水平的實(shí)驗(yàn)控制，使研究人員能夠?qū)⒅匾募?xì)胞外基質(zhì)特性調(diào)整到程度,。我們是一家提供可以調(diào)整以匹配各種人體組織特性的公司,，例如大腦、肝臟,、乳房,、前列腺、皮膚,、軟骨等等,。
-LunaGelTM材料促進(jìn)自然細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用，并提供生物學(xué)相關(guān)性,，具有非凡的翻譯價(jià)值,。
--LunaGelTM是市場(chǎng)上最快的3D細(xì)胞培養(yǎng)分析方法。例如,，創(chuàng)建3D培養(yǎng)只需不到15分鐘,，而市場(chǎng)領(lǐng)xian產(chǎn)品Matrigel(Corning)需要3-4個(gè)小時(shí)。
-由于交聯(lián)性獨(dú)立于天然生物材料形成水凝膠的固有能力(已知不同批次的水凝膠差別很大),，LunaGelTM提供了實(shí)驗(yàn)重復(fù)性,。
-我們的即用型免優(yōu)化套件和LunaCrosslinker設(shè)計(jì)極其簡(jiǎn)單，因此降低了科學(xué)家在沒(méi)有3D細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的情況下進(jìn)入市場(chǎng)的門檻,。
-由于LunaGel產(chǎn)品不需要冷卻,，而且粘度低于Matrigel等大多數(shù)天然生物材料，因此我們的技術(shù)與自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)*兼容，從而實(shí)現(xiàn)了3D細(xì)胞培養(yǎng)方法的可擴(kuò)展性,。
下面是我們相對(duì)于市場(chǎng)領(lǐng)xian產(chǎn)品的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的高級(jí)圖形比較和演示,。
LunaCrosslinker™可見(jiàn)光交聯(lián)系統(tǒng)
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會(huì)員.png)
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